[发明专利]一种反式草木樨苷的制备方法

说明书

本发明公开了一种化合物的制备方法，具体来说公开了一种从大叶紫珠中制备反式草木樨苷的方法；该方法依次利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH‑20柱层析、反相硅胶柱层析的方法从大叶紫珠叶中提取反式草木樨苷；本发明工艺简单,周期短，得率高，纯化效率高，制备反式草木樨苷含量可达到90%‑99.9%。

技术领域

本发明属于化学医药领域，涉及化学领域化合物的提取制备方法，具体涉及一种从大叶紫珠叶子中制备反式草木樨苷的方法。

背景技术

大叶紫珠Callicarpa macrophylla Vahl为马鞭草科紫珠属植物的干燥叶或带叶嫩枝，是2010年版中国药典Ⅰ部新增品种，性平，归肝、肾、胃经，具有散瘀止血，消肿止痛之效；常用于咯血、吐血、便血、外伤出血、跌打肿痛。目前关于大叶紫珠的成分研究报道较少，主要为酚酸类、黄酮类、萜类和甾醇类化合物。

反式草木樨苷(trans-Meliotosid-e)为我公司首次从大叶紫珠中分离得到一个酚酸类化合物。其分子式为C15H18O8 ，其结构见图1，反式草木樨苷具有显著的抗氧化及抑制细胞中自发性弹性蛋白酶释放的药理活性，具有很好的开发前景。目前关于反式草木樨苷的研究报道较少，尚未有一种适合产业化生产同时制备高纯度反式草木樨苷的工艺路线披露。市场上反式草木樨苷的产量少，得率低，难以满足研发需求，严重限制其深入研究。本发明利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析、反相硅胶柱层析从大叶紫珠的叶子中制备反式草木樨苷，工艺简单，得率高，周期短，分离效果好。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备反式草木樨苷的方法，本发明方法不仅操作工艺简单，得率高，利用本发明可在一个工艺流程中制备得到纯度达到90%以上的反式草木樨苷。

为了解决上述问题，本发明提供一种制备反式草木樨苷的方法，依次以：用硅胶柱进行层析；用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱进行层析；用反相硅胶柱进行层析的方法从大叶紫珠叶子中提取反式草木樨苷。

上述制备反式草木樨苷的方法具体包括以下步骤：

a：粉碎大叶紫珠，以含水甲醇作为提取溶剂进行提取处理，将提取处理所得提取液减压浓缩，得到甲醇提取物浸膏。

b：将步骤 a 获得的甲醇提取物浸膏以正丁醇为萃取剂进行萃取处理，合并萃取液，减压浓缩得到正丁醇部位。

c：将步骤 b获得的正丁醇部位提取物以硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到反式草木樨苷粗品。

d：将步骤c获得的反式草木樨苷粗品以葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱进行层析处理，收集，检测，合并，浓缩，得到含反式草木樨苷的洗脱液。

e：将步骤d获得的含反式草木樨苷的洗脱液以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测，合并，浓缩洗脱液，干燥后得到反式草木樨苷纯品。

进一步的改进是：步骤a中所述含水甲醇的提取溶剂，其质量百分比浓度为30%-99.9%。

进一步的改进是：步骤a中所述含水甲醇的提取溶剂，其质量百分比浓度优选50%-70%。

进一步的改进是：步骤a中所述以含水甲醇为提取溶剂进行的提取处理，采用浸泡或渗漉或加热的回流方式。

进一步的改进是：步骤b中所述萃取处理中正丁醇和甲醇提取物浸膏比例为（1-3）：1（v/v）。

进一步的改进是：步骤b中所述以正丁醇为萃取剂进行萃取处理，萃取次数为3-5次。

进一步的改进是：步骤c中所述以硅胶柱进行层析处理的硅胶柱，其硅胶目数为100-400目。

进一步的改进是：步骤c中所述以硅胶柱进行层析处理的硅胶柱，其层析柱径高比为1：10-1：18。