[发明专利]高温期间养殖水体降碱脱氮的生物制剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高温期间养殖水体降碱脱氮的生物制剂及其制备方法，属于水产养殖技术领域。

背景技术

随着经济的快速发展和养殖业者对高产高效益的追求，中国的水产养殖朝着高密度、集约化、规模化的方向发展，形成了高生物负载量和高投入量的养殖模式，使得水体的富营养化日益严重。水体富营养化的根本原因是植物性营养元素（氮、磷）的含量过高，而氮磷等植物性营养元素来自工业废水、生活污水的不当排放以及水产养殖中过量投入饲料、渔肥等产生的自身污染。

养殖水体富营养化的直观表现是水体中氮磷元素含量高，水体中的藻类（主要是蓝藻）短时间内大量繁殖并聚集，造成水体pH升高，溶氧下降，氨氮和亚硝态氮对养殖生物产生毒性。尤其在高温期间，随着水温的不断升高，养殖水体中的有害微生物剧增，水体中残剩的肥料、饲料、生物排泄物和代谢产物不断地累积，可分解产生氨氮、亚硝酸盐等有害物质，降低水体溶氧，影响水环境质量，危害养殖生物健康。而此时因藻类大量生长，使水体pH值上升，加剧了这种危害作用。因此如何在保证高温期间养殖生物安全的前提下有效净化养殖水质、降低水质pH和氮素含量是养殖业者关注的焦点。

近年来，相关的研究和应用取得了一定的效果，主要是通过外源添加高活性的微生物来达到净化的目的，但同样存在诸多问题。在水产养殖水体的净化上，多采用安全高效的微生物控制技术，如EM菌、芽孢杆菌等，成本低、使用方便、效果显著，可有效控制水体的有机污染，降低水体中氨氮、亚硝酸盐的污染水平。但目前所使用的这类微生物制剂多为好氧性微生物，在高温季节使用会加大水体的耗氧，使得本身含量已不高的溶解变得更低，甚至可导致水体缺氧。而低溶氧又反过来抑制微生物本身的活性。同时此类微生物对水体pH的降低和稳定效果不佳。而高pH下一些无机氮素对养殖生物的毒性会增强。因此水产养殖在高温期的一项重点工作是水质的健康管理，降低pH、有效去除氮素，这需要开发一种环境友好的，集净化水质、防止缺氧、降碱脱氮于一体的功能性生物制剂，为水产养殖的良性发展提供技术支撑。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种高温期间养殖水体降碱脱氮的生物制剂及其制备方法，利用短乳杆菌、脱氮副球菌的高浓度培养物和乳酸、聚氧乙烯山梨醇酐单棕榈酸酯，经合理加工和复配后直接投入养殖水体，快速有效降解养殖水体中的蛋白质、碳水化合物等有机物质，去除水体中氨氮、亚硝酸盐等有害氮素，不增加水体耗氧率，降低并维持水体pH的稳定，拮抗水体中的有害微生物、防止水草腐烂，促进养殖生物的摄食，优化和修复养殖环境，为高温期的养殖生物营造一个健康良好的水体生态环境。

本发明为解决上述技术问题而采用的技术方案是：一种高温期间养殖水体降碱脱氮的生物制剂，按重量份计包括：短乳杆菌的高浓度培养物45~55份，脱氮副球菌的高浓度培养物35~50份，乳酸3~5份，聚氧乙烯山梨醇酐单棕榈酸酯1~2份。将上述物料混合均匀后装入包装瓶中，即得产品高温期间养殖水体降碱脱氮的生物制剂。

一种高温期间养殖水体降碱脱氮的生物制剂的制备方法，其主要步骤如下：

（1）短乳杆菌的高浓度培养物制备：从试管斜面上取一环短乳杆菌菌苔，接种到50 mL经过灭菌处理的MRS液体培养基中，于35 ℃静置培养40 h；然后将其接入5 L经过灭菌处理的MRS液体培养基中，于35 ℃静置培养30 h，制成菌种种子液备用；此时菌种种子液的活菌数≥10⁹ CFU·mL^-1；

在0.5吨不锈钢发酵罐中加入总体积350 L的液体发酵培养基，经121 ℃灭菌处理15 min后冷却备用；

将上述菌种种子液接入不锈钢发酵罐，在35 ℃、转速120 r·min^-1的条件下培养30 h，待菌种种子液浓度≥10⁹CFU·mL^-1时放入经灭菌的500 L桶中备用；

（2）脱氮副球菌的高浓度培养物制备：从试管斜面上取一环脱氮副球菌菌苔，接种到50 mL经过灭菌处理的LB液体培养基中，于30 ℃静置培养30 h；然后将其接入5 L经过灭菌处理的LB液体培养基中，于30 ℃静置培养28h，制成菌种种子液备用；此时菌种种子液的活菌数≥10⁹ CFU·mL^-1；

在0.5吨不锈钢发酵罐中加入总体积350 L的液体发酵培养基，经121 ℃灭菌15 min后冷却备用；