[发明专利]一种快速抗菌试验方法及试剂盒

权利要求书

1.一种快速抗菌试验试剂盒,其特征在于:包括无菌多孔检测板、保湿保温培养盒、培养液、试验菌、阳性对照抗菌剂，所述无菌多孔检测板含有3个或3个以上大小均等的检测孔，检测孔底部为厚薄一致、质地均匀的透明材料，所述保湿保温培养盒由盒身和盒盖组成，盒身内能够平放1-10个检测板，所述培养液为试验菌生长所需培养液。

2.根据权利要求1所述的一种快速抗菌试验试剂盒，其特征在于：所述无菌多孔检测板含有3行5列共15个检测孔，左边3列为试样孔，右边2列为对照孔，每个检测孔的容积为0.1-0.5ml。

3.根据权利要求1或2所述的一种快速抗菌试验试剂盒，其特征在于：所述试验菌装在带盖的瓶子内，瓶子内装有斜面琼脂培养基，试验菌长在斜面琼脂培养基上。

4.根据权利要求3所述的一种快速抗菌试验试剂盒，其特征在于：所述试验菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌或待查菌。

5.根据权利要求1或2所述的一种快速抗菌试验试剂盒，其特征在于：所述阳性对照抗菌剂是水溶性抗菌试剂。

6.根据权利要求1或2所述的一种快速抗菌试验试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括3个或以上大小均等的细菌培养管，细菌培养管是透明的玻璃管或塑料管。

7.一种快速抗菌试验方法，其特征在于：在波长470nm下检测菌液的吸光度来判定试验菌的密度。

8.根据权利要求7所述的一种快速抗菌试验方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)试验菌液准备：试验菌液的OD470达到0.5-0.8；

(2)试样液及对照液准备；

(3)抗菌反应及终止；

(4)检测抗菌效果：将菌液起始OD值控制在OD470为0.1-0.3，通过在470nm波长下检测菌液在后续培养过程中的吸光度变化来判定试样的抗菌效果。

9.根据权利要求8所述的一种快速抗菌试验方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)试验菌液准备：挑取经24h斜面培养的试验菌或过夜摇菌培养的试验菌，用培养液稀释至OD470为0.2-0.3,然后摇床培养至OD470达到0.5-0.8；

(2)试样液及对照液准备：分别配制0.2-1ml的等量各待测试样液和对照液，对照液包括阳性对照液和阴性对照液，所述的阴性对照液是不含任何抗菌剂的溶剂；

(3)抗菌反应及终止：取0.01-0.1ml的定量试验菌液，分别与各试样液及对照液混合，试验菌液与试样液或对照液的混合体积比例为1：2-1：10；混合后计时，反应1-20min，然后，离心、除去上清、加入0.2-5ml的等量培养液重悬以终止反应；

(4)检测抗菌效果：分别取0.1-1ml各试样组和对照组的等量的重悬菌液，用培养液稀释1-5倍至OD470为0.1-0.3后分置于无菌多孔检测板的不同孔中，检测起始OD470，然后在保湿保温培养盒底部放置无菌湿纸巾，将无菌多孔检测板置于无菌湿纸巾上，在37℃摇床中摇动培养1-5h，每小时检测一次OD470，通过OD470的数值变化判断各待测试样的抗菌效果。

10.一种快速抗菌试验方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)试验菌液准备：挑取经24h斜面培养的试验菌或过夜培养的试验菌，用培养液稀释5-20倍后摇床培养至可见混浊；

(2)试样液及对照液准备：分别配制0.5-2ml的等量各待测试样液和对照液，对照液包括阳性对照液和阴性对照液，所述阴性对照液是不含任何抗菌剂的溶剂；

(3)抗菌反应及终止：取0.05-0.2ml的定量试验菌液分别与各待测试样液及对照液混合，反应1-20min，然后加入5-10倍培养液以终止反应；

(4)检测抗菌效果：分别取0.1-1ml各试样组和对照组的终止反应后的等量菌液置于不同细菌培养管中，用培养液稀释1-5倍至无明显可见混浊止，然后置于37℃摇床中培养1-2h或室温培养18-24h，观察并对比各管中液体的混浊程度判断各待测试样的抗菌效果。