[发明专利]用于鉴定地顶孢霉诱变株MKL18的引物对和试剂盒有效
| 申请号： | 201410572451.2 | 申请日： | 2014-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN104313151A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 石应辉;胡青松;桂向东;李晓祥 | 申请（专利权）人： | 安徽新星生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥市*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 鉴定 顶孢霉 诱变 mkl18 引物 试剂盒 | ||
1.用于鉴定地顶孢霉诱变株MKL18(Acremonium terricola MKL18)的引物对，其特征在于，碱基序列为：
正向引物：5'-CCAATGCCCTTCGGGGCTCTCTGG-3'；
反向引物：5'-GGGATTGGGTAATTTGCGCGCCT-3'。
2.一种用于鉴定地顶孢霉诱变株MKL18的试剂盒，包含有引物对，其特征在于，所述引物对为如权利要求1所述用于鉴定地顶孢霉诱变株MKL18的引物对。
3.一种鉴定地顶孢霉诱变株MKL18的方法，其特征在于，包括：
(1)提取待测菌株的基因组DNA；
(2)以所述基因组DNA为模板，利用如权利要求1所述的引物对进行PCR扩增；
(3)对扩增产物进行序列测定，根据测序结果鉴定待测菌株是否为地顶孢霉诱变株MKL18。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，PCR扩增的反应体系为：按50μL体系计，其中包括：5U/μL的高保真耐高温聚合酶1.0μL，10×缓冲液5.0μL，25mM的MgCl23.0μL，各2.5mM的dNTPs混合物4.0μL，正向和反向引物各1.0μL，100ng/μL的基因组DNA 1.0μL，灭菌双蒸水34μL。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，PCR扩增程序为：95℃预变性4min；95℃变性45s，68℃退火/延伸反应45s，共计25个循环；72℃延伸3min。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述引物对的扩增产物是地顶孢霉18S rDNA的230bp目标片段。
7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，地顶孢霉诱变株MKL18扩增产物的碱基序列如SEQ ID No.1所示。
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