[发明专利]RSV特异性结合分子和产生它们的方式

说明书

本申请是2008.05.30提交的CN 200880023301.9，题为“RSV特异性结合分子和产生它们的方式”的分案申请。

本发明涉及生物学和医学领域。

呼吸道合胞病毒(RSV)是常见的感冒病毒，属于副粘病毒科。RSV有毒力、容易传播，并且是2岁以下儿童的下呼吸道疾病的最常见病因。在一个RSV季节中，高达98％的日托儿童将被感染。感染RSV的儿童中0.5％至3.2％需要住院治疗。在美国，每年约有90,000例就医和4500例死亡。由于RSV导致住院治疗的主要风险因素是早产、慢性肺病、先天性心脏病、免疫机能不全和其他方面健康的6周龄以下的儿童。对RSV阳性细支气管炎没有有效治疗，只能进行足够营养和氧疗形式的支持性护理。抗病毒治疗如利巴韦林在RSV感染中无效。一种单克隆抗体帕丽珠单抗(也称为Synagis)注册用于预防RSV感染。帕丽珠单抗是遗传改造(人源化)的RSV融合蛋白的单克隆抗体。然而，帕丽珠单抗不总是有效。因此，本领域需要其他抗体和治疗来对抗RSV。

本发明的目的是提供对抗和/或预防RSV相关疾病的方式和方法。本发明的另一个目的是提供另选和/或改进的RSV抗体或其功能等同物，并提供能够产生RSV抗体或其功能等同物的稳定细胞。

本发明提供能够特异性结合RSV的抗体和其功能等同物。这类抗体和/或功能等同物在本文中也称为“抗-RSV抗体”或“RSV-特异性抗体”，它们能够特异性结合RSV的至少一种组分，例如RSV蛋白质的某表位。术语“特异性结合”不包括非特异性粘附。本发明抗-RSV抗体和功能等同物特别适合对抗和/或至少部分预防RSV感染和/或RSV感染的不良影响。本发明的一种特别优选的抗-RSV抗体是称为“D25”的抗体，它具有如图11A-D所示的重链区和轻链区。具体产生D25的抗原结合特性的D25的CDR序 列见图11D。与已注册的抗-RSV抗体帕丽珠单抗相比，抗体D25似乎具有优异的性能(图8)。例如，D25在HEp-2细胞感染RSV的体外中和实验中的IC50值约为0.4-1.5ng/ml，而帕丽珠单抗的IC50值约为453ng/ml。

在本文中，将抗体的功能等同物定义为抗体的功能性部分、衍生物或类似物。

抗体的功能性部分定义为与所述抗体具有至少一种相同特性(种类相同，而量不一定相同)的部分。所述功能性部分能够与所述抗体结合相同抗原，但结合程度不一定相同。抗体的功能性部分优选包括单结构域抗体、单链抗体、单链可变区片段(scFv)、Fab片段或F(ab')₂片段。

抗体的功能性衍生物定义为经改造所得化合物的至少一种特性–优选抗原结合特性–种类基本相同，而量不一定相同的抗体。以多种方式，例如通过保守性氨基酸取代提供衍生物，其中氨基酸残基被性质(大小、疏水性等)基本相似的另一残基取代，使得总体功能不大可能受到严重影响。

本领域技术人员能够产生抗体的类似化合物。通过筛选肽文库或噬菌体展示文库进行这种操作。这种类似物基本上与所述抗体具有至少一种种类相同而量不一定相同的特性。

如本领域技术人员所熟知，抗体重链是构成免疫球蛋白分子的两种链类型中较大的那种类型。重链包括恒定区和可变区，其中可变区参与抗原结合。抗体的轻链是构成免疫球蛋白分子的两种链类型中较小的那种类型。轻链包括恒定区和可变区。可变区与重链可变区一起参与抗原结合。

互补决定区(CDR)是重链可变区和轻链可变区中的高变区。抗体的重链和连接的轻链的CDR一起形成抗原结合位点。

既然本发明认识到图11所示CDR序列提供所需RSV结合特性，技术人员就能够产生包含至少一个改变的CDR序列的变体。例如，应用保守性氨基酸取代。保守性氨基酸取代包括用性质(大小、疏水性等)基本相似的另一种氨基酸取代一种氨基酸，使得总体功能不大可能受到严重影响。