[发明专利]一种采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法

权利要求书

1.一种采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法，其特征在于，包括有以下步骤：

a、设计一种电泳芯片：电泳芯片设置有十字形微管道，十字形微管道包括有横向微管道以及与横向微管道交错布置的纵向微管道，横向微管道包括有位于纵纵向微管道左端侧的左横向微管道以及位于纵向微管道右端侧的右横向微管道，纵向微管道的前端延伸至横向微管道的前端侧，左横向微管道、右横向微管道的末端分别设置有朝后延伸且与纵向微管道平行布置的平行段，各平行段的末端分别设置与至少两条分支微管道，各分支微管道的末端以及纵向微管道的前端分别设置有样品池，左横向微管道、右横向微管道的中部分别设置有朝后延伸的支向微管道，各支向微管道的末端分别设置有缓冲池，纵向微管道的后端设置有废液池，在废液池的前部纵向微管道上设置有检测点；连通样品池和废液池之间的微管道构成进样通道；连通缓冲池和废液池之间的微管道构成分离通道；

b、抽取血清或者血浆样品；

c、样品稀释及染料预染：取5 μL血浆或者血清样品，用凝胶电泳缓冲液进行1：50倍稀释且预染5分钟，凝胶电泳缓冲液由250 mmol/L的缓冲液与5μmol/L的脂蛋白染料组成；

d、将10μL电泳凝胶介质通过电泳芯片的分离通道加入缓冲池内，用1mL针筒空气加压至电泳芯片的进样通道和分离通道，电泳凝胶介质由200 mmol/L的缓冲液、浓度为0.1%、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%、5.0% 或者10%的多聚体凝胶体、0.15 μmol/L的脂蛋白染料组成；

e、通过电泳芯片的进样通道对样品池加入10 μL稀释及预染的血清或者血浆样品；

f、将加样后的电泳芯片放在微流控芯片检测仪上进行微流控芯片自动电泳；

g、计算机对微流控芯片检测仪所得到的结果进行自动处理分析。

2.根据权利要求1所述的采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法，其特征在于：所述凝胶电泳缓冲液以及所述电泳凝胶介质中的缓冲液为TE缓冲液或者N-三（羟甲基）甲基-3-氨基丙磺酸，且缓冲液的PH值可在下列数值中选择：7.0、7.5、8.0 或者8.5。

3.根据权利要求2所述采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法，其特征在于：所述脂蛋白染料为下列中的一种：苏丹黑B、1，1′-双十八烷基-3，3，3′，3′-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐、1，1′-双十八烷基-3，3，3′，3′-四甲基吲哚羰花青，4-氯苯盐 或者 C6-NBD神经酰胺。

4.根据权利要求3所述采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法，其特征在于：所述多聚体凝胶体为下列中的一种：聚丙烯酰胺凝胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚氧化乙烯、聚N，N-二甲基丙烯酰胺或者羟基纤维素。

5.根据权利要求1所述采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法，其特征在于：所述微管道的横截面呈方形，其深度可在下列范围内选择：8～35μm ,宽度可在下列范围内选择：50～150μm 。

6.根据权利要求5所述采用微流控芯片分析血清脂蛋白亚型精细亚组分的方法，其特征在于：所述分离通道的形状设置成S形结构。