[发明专利]从胃癌组织中高效分选单核样骨髓来源免疫抑制细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201410594448.0 申请日: 2014-10-29
公开(公告)号: CN104357395A 公开(公告)日: 2015-02-18
发明(设计)人: 王国斌;李钢 申请(专利权)人: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
主分类号: C12N5/0789 分类号: C12N5/0789
代理公司: 武汉楚天专利事务所 42113 代理人: 雷速
地址: 430022 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 胃癌 组织 高效 分选 单核 骨髓 来源 免疫抑制 细胞 方法
【权利要求书】:

1.一种从胃癌组织中高效分选单核样骨髓来源免疫抑制细胞的方法,包括以下步骤:

步骤一:机械法剪碎所取人类胃癌标本组织;

步骤二:使用200目尼龙网结合负压抽吸装置组成的过滤单元反复操作获取单细胞悬液;

步骤三:使用双层Ficoll-Paque分离液梯度密度离心法分离和纯化所获取的单细胞悬液;

步骤四:采用CD14+阳性选择免疫磁珠细胞分选方法获得人类胃癌组织中的单核样骨髓来源免疫抑制细胞。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于使用机械法获取单细胞悬液。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,获取单细胞悬液方法是使用200目尼龙网结合负压抽吸装置组成的过滤单元。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在获取目标细胞群体后加入了功能性验证步骤,即T细胞免疫功能抑制实验。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的功能性验证步骤是通过功能学实验将所获得的单核样骨髓来源免疫抑制细胞与正常人外周血CD4+T细胞共培养,进一步证实该群细胞具有抑制T细胞免疫功能及参与人类胃癌免疫逃避机制。

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