[发明专利]一种合成加尼瑞克的方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种合成加尼瑞克的方法。

背景技术

加尼瑞克(商品名：)，由默沙东公司(在美国和加拿大被称为默克)研发、生产。2013年经中国国家食品药品监督管理总局批准在中国上市。

加尼瑞克是一种促性腺激素释放激素(GnRH)的拮抗剂，是一种合成十肽，对天然生成的促性腺激素释放激素(GnRH)具有高的拮抗活性。可竞争性阻断垂体促性腺细胞上的GnRH受体，以及其后的转导通路，从而产生一种快速、可逆的促性腺激素分泌抑制作用。在辅助生殖医学控制性促排卵治疗中，用于拮抗剂方案。

Cochrance一项荟萃分析显示拮抗剂方案能够减轻接受辅助生殖技术女性的治疗负担，也能减少严重不良事件如卵巢过度刺激综合症(OHSS)等的发生。

加尼瑞克结构式为：

Ac-D-Nal-D-Cpa-D-Pal-Ser-Tyr-D-Har(Et₂)-Leu-Har(Et₂)-Pro-D-Ala-NH₂

国内外关于加尼瑞克制备报道的报道很多，美国专利US4801577、US5212288、US55767082公开的方法为Boc固相合成方法，该方法规模很小，工艺过程需要使用剧毒品氢氟酸(HF)裂解，对人和环境有较大的危害，不适合大规模工业合成；

申请号为201210028919的中国专利所公开的方法为在接肽过程中，肽序第6、8位氨基酸偶联分别采用Fmoc-D-Har(Et₂)-OH和Fmoc-Har(Et₂)-OH为原料，完成氨基酸偶联后去保护，再进行乙酰化反应，由于部分侧链未保护，在乙酰化过程中容易产生乙酰化杂质，影响了产品纯度和收率；申请号为201410265365的中国专利所公开的方法为在接肽过程中，肽序第6、8位氨基酸偶联分别采用Fmoc-D-Lys(Dde)-OH和Fmoc-Lys(Dde)-OH为原料，完成偶联后去侧链保护，再通过化学修饰形成产品，但该方法同样会产生乙酰化杂质。同时上述两种工艺中在酸解时采用的酸解液不够合理，也是造成收率下降的原因之一。根据申请号为201410265365的中国专利记载的试验数据，申请号为201210028919的中国专利的总收率在40％，纯度在99.35％，而申请号为201410265365的中国专利最好的总收率为55％，纯度为99.65％。加尼瑞克的合成工艺仍有待进一步改进。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种加尼瑞克的制备方法，使得本发明所述方法具有较高的总收率，同时提高了加尼瑞克的纯度，并且，环保安全。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种合成加尼瑞克的方法，包括以下步骤：

步骤1、N端偶联有保护基的D-丙氨酸在缩合试剂和活化试剂作用下和氨基偶联有保护基的氨基树脂进行酯化反应，得到肽树脂1；

步骤2、按照加尼瑞克氨基酸序列C端到N端的顺序，从肽树脂1出发，在缩合试剂和活化试剂作用下，将其余保护氨基酸进行逐一延伸偶联，每次延伸偶联后均得到对应的肽树脂，最终获得加尼瑞克树脂，然后酸解获得加尼瑞克粗品，加尼瑞克粗品纯化得到加尼瑞克纯品；

所述酸解采用由体积百分比为80-95％的TFA、体积百分比为1-10％的EDT、余量为水组成的混合酸解液酸解。

加尼瑞克主链氨基酸有10个，组成如下：

Ac-D-Nal¹-D-Cpa²-D-Pal³-Ser⁴-Tyr⁵-D-Har(Et₂)⁶-Leu⁷-Har(Et₂)⁸-Pro⁹-D-Ala¹⁰-NH₂。

其中，加尼瑞克C端的氨基为采用裂解液从氨基树脂上裂解下来的氨基，其并不属于氨基酸上的氨基。

本发明针对现有技术中采用的合成工艺易造成加尼瑞克总收率较低、对人和环境有危害的缺陷，同时为了避免乙酰化过程中的副反应，在接最后一个氨基酸的时候，特别选择了Ac-D-Nal作为原料，并优化了整个合成工艺，选择合适的酸解液以及氨基树脂进行合成，本发明所述合成工艺既可以采用固相合成，也可以采用液相合成。