[发明专利]一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法

权利要求书

1.一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）虾壳预处理：对于未经烹饪的新鲜虾壳洗净、烘干、粉碎、置于干燥器中备用；或者对于烹饪后的虾壳清理后洗净，经无水乙醚和无水乙醇依次洗涤，用蒸馏水洗净后过滤、烘干、粉碎、置于干燥器中备用；

（2）甲壳素提取：按料液比1g：24～30ml称取虾壳粉加入质量浓度为18-20%EDTA溶液，EDTA溶液pH值为13，置于超声波清洗器中搅拌反应45-60min，超声频率为60KHz、功率为180W-240W，反应后过滤并以蒸馏水洗涤滤渣，收集滤渣烘干，再用过氧化氢溶液浸泡脱色，洗净烘干后的白色粉末为甲壳素；

（3）壳聚糖制备：按料液比1g：20ml称取甲壳素粉加入蒸馏水，100℃恒温水浴1-2h后，置于超声频率25KHz，功率400-500W超声波清洗器中，处理40-60min后，按体积比加入7%-10%的CDA粗酶液，磁力搅拌水浴50℃恒温酶解2.5-3.5h，酶反应结束后，以100℃水浴下连续热灭活15 min终止酶反应，迅速冷却至室温，离心，蒸馏水反复洗涤至中性，沉淀物烘干得壳聚糖。

2.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（1）中虾壳60℃烘干，粉碎过20目筛。

3.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（1）中所述无水乙醚洗涤和无水乙醇洗涤各5次。

4.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（2）中收集滤渣50℃烘干，再用质量浓度10%的过氧化氢溶液在35℃水浴中浸泡2h脱色。

5.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（2）中以蒸馏水洗涤滤渣，提取滤液，用盐酸调节滤液pH=1，使 EDTA 以酸的形式沉淀回收。

6.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（3）中称取的甲壳素粉过80目筛。

7.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（3）中酶反应期间以质量浓度为0.1mol/l的NaOH调节pH=7.5。

8.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（3）中所述离心条件是指9000rpm离心10min。

9.根据权利要求1所述的一种超声波协同CDA酶制备龙虾壳壳聚糖的方法，其特征在于：所述步骤（3）中CDA粗酶液酶活200U/mL左右。