[发明专利]一种重组牦牛皱胃凝乳酶及其制备方法在审
| 申请号： | 201410607090.0 | 申请日： | 2014-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN104328134A | 公开（公告）日： | 2015-02-04 |
| 发明（设计）人： | 江明锋;罗樊 | 申请（专利权）人： | 西南民族大学 |
| 主分类号： | C12N15/57 | 分类号： | C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/64;C12R1/84 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610041 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 牦牛 皱胃 凝乳 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。
2.一种重组载体，其特征在于：包含SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述的重组载体是重组pPICZαA质粒。
4.一种重组菌，其特征在于：它包含权利要求2或者3所述的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述的重组菌为重组毕赤酵母。
6.一种凝乳酶，其特征在于：它由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列编码。
7.根据权利要求6所述的凝乳酶，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
8.一种采用权利要求4或者5所述的重组菌发酵的方法，其特征在于：包含如下步骤：
ⅰ、取权利要求4或者5所述的重组菌，接种到BMGY培养基上培养，培养温度为30℃，pH为6.0，至OD600＝2～6；
ⅱ、收集菌体，将其培养在BMMY培养基中，培养温度为30℃，pH为6.0，培养至OD600＝1时，加入甲醇至浓度1％(v/v)进行诱导表达，之后每24小时添加一次甲醇，每次添加甲醇至浓度为1％(v/v)，诱导时间为24～184h；
ⅲ、离心，取上清，即包含凝乳酶的发酵产物。
9.权利要求8所述方法制备得到的发酵产物。
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