[发明专利]一种烟草中氟节胺、仲丁灵和除芽通残留量的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于农药残留检测领域，涉及烟草中农药残留量检测技术，特别涉及烟草中常用植物生长调节剂残留量的测定方法，具体是检测烟草中氟节胺、仲丁灵和除芽通的残留量。 

背景技术

生长调节剂在现代农业、果蔬及烟叶生产中应用十分广泛，给人们的生产生活带来了巨大的利益。随着人们环保意识的增加，人们不仅注重作物的产量和营养，更加关注对环境的影响以及食品安全问题。国际烟草科学研究合作中心（CORESTA）的农用化学品咨询委员会(ACAC)在2008年制定的118种农用化学品指导性残留限量表中将氟节胺、仲丁灵和除芽通的限量定为5mg/kg。 

烟草常施用的植物生长调节剂有可能会超出指导限量，因此监测烟草常施用农药的残留量尤为重要。烟叶植物生长调节剂的分析方法主要有气相色谱法（GC）、气相色谱-串联质谱法（GC–MS/MS）和高效液相色谱-串联质谱法（LC–MS/MS）。廖雅桦等利用凝胶渗透色谱处理烟叶样品，高效液相色谱-串联质谱法测定了烟草中二甲戊灵、仲丁灵和马来酰肼等抑芽剂残留。陈晓水等利用GC-MS/MS同时测定了烟草中的氟节胺等132种农药残留，此方法适合于有机磷、有机氯和菊酯类农药的检测。2011年，烟草行业制定一系列多农残检测标准，而这3种常用农药分列于两个检测标准，其中GC-ECD法测定氟节胺和除芽通需要通过基质分散提取，单独的固相萃取和旋转蒸发浓缩，使得前处理过程较为复杂，繁琐，并且标准方法虽然为多农残检测方法，但检测时间较长，不利于单独筛查植物生长调节剂的残留量。 

发明内容

鉴于此，本发明目的在于提供一种简便、快捷的氟节胺、仲丁灵和除芽通残留量的检测方法。 

为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种烟草中氟节胺、仲丁灵和除芽通残留量的测定方法，包括以下步骤： 

1）提取烟草中的目标物：

称取烘干磨好的烟叶样品，加入纯水浸润，依次加入内标和乙腈，涡漩混合振荡；放入冰箱冷冻后取出，依次加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠，涡旋振荡后离心；

2）N-丙基乙二胺纯化：

移取上清液于新的离心管中，加入无水硫酸镁及PSA吸附剂，于漩涡振荡混合，然后高速离心；吸取上清液经有机相滤膜过滤，移取滤液，并用乙腈和超纯水稀释后待测；

3）标准储备液和标准工作液的配制：

用乙腈配制氟节胺、仲丁灵和除芽通标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存；取一定量的各化合物储备液进行混合，用乙腈稀释定容，制得混合标准储备液；

用乙腈准确配制二甲戊灵-d5内标储备液，用内标储备液配制内标工作液，储存于棕色玻璃瓶中；所有的储备液于-20℃保存，使用前将其恢复到室温；

用空白烟叶的萃取基质配制不同浓度的氟节胺，仲丁灵和除芽通标准工作溶液；

4）液相色谱-串联质谱测定：

吸取空白烟叶溶液和配制好的不同浓度的氟节胺、仲丁灵和除芽通标准工作溶液，注入串联质谱检测器，按内标法以峰面积计算出样品待测液中氟节胺、仲丁灵和除芽通含量；

前述串联质谱检测器为UPLC-MS/MS系统，选取的色谱柱为UPLC色谱柱：UPLCHSST3，规格为100mm×2.1mm、1.8μm，柱温35°C；进样量10μL；串联质谱检测的条件为：电喷雾离子源，喷雾电压：2.6kV；离子化温度350℃；雾化气流量：1000L/Hr；锥孔气流量50L/Hr；碰撞气流量为0.15ml/min；碰撞气为氩气，其余气体为氮气；驻留时间为30msec，正离子MRM模式采集；洗脱条件为梯度洗脱，选取70%流动相A：甲酸水和30%流动相B：乙腈初始流动相体系，分析时间为5min，进样量为5μL；所述甲酸水中甲酸体积分数为0.1%，所述甲酸甲醇溶液中甲酸体积分数为0.1%。

优选地，所述步骤1）中提取过程依次加入的超纯水，10μg/mL内标，乙腈的体积分别为200μL和10mL。 

优选地，所述涡漩振荡速率为2000rpm，震荡时间1min，离心管在-10℃条件下保持10min。 

优选地，所述无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠和柠檬酸二氢钠的质量分别为4g、1g、1g和0.5g。 

优选地，所述漩涡混合振荡的速率为2000rpm，振荡时间为2min，以4000rpm的速率离心10min。 

优选地，步骤2）中，加入无水硫酸镁及PSA吸附剂的质量为150mg和25mg。