[发明专利]一种检测拟盐皮质激素增多症相关基因突变的试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学领域，涉及医学诊断和生物技术，涉及一种检测拟盐皮质激素增多症相关基因突变的体外诊断试剂盒，是一种应用于新一代测序平台技术的一种拟盐皮质激素增多症相关基因突变的试剂盒。 

技术背景

拟盐皮质激素增多症(Apparent mineralocorticoid excess，AME)AME患者体内并不存在盐皮质激素过多，恰恰相反，这类患者血压异常升高的原因是糖皮质激素过多，主要是皮质醇增多所致。 

人体盐皮质激素受体和糖皮质激素受体同源性高达94％。体外实验证明，糖皮质激素和盐皮质激素对醛固酮受体具有同样的亲和性。考虑到血中糖皮质激素浓度远远高于盐皮质激素，因此体内必然存在一种机制以保证盐皮质激素和其受体特异结合，这种机制便是11β-羟固醇脱氢酶(11β-hydroxysteroid dehydrogenase，11β-HSD)对皮质醇的灭活作用。 

11β-HSD有两种异构体，11β-HSD I主要存在于肝脏，11β-HSD II主要存在于肾脏和胎盘。AME是由于11β-HSD II缺陷造成的。已报道的11β-HSD II基因突变多达十几种，分别位于第3、4、5外显子和内含子3。 

HSD11B2基因位于16q22，该基因发生突变可导致11β-HSD II酶无活性或活性降低，大量皮质醇不能被转化成皮质酮，大量蓄积的皮质醇占据远端肾小管的盐皮质激素受体，激活转录因子及血清糖皮质类固醇激酶，使泛素连酶Nedd4-2磷酸化，磷酸化的Nedd4-2不能与ENaC结合进而灭活ENaC，导致ENaC活性升高，钠重吸收增加，出现类似醛固酮增高的临床表现-高血压和低血钾，即称类盐皮质激素增多症(AME)。HSD11B2基因突变不仅导致基因表达降低或对底物的亲和力降低，也可导致11β-HSD II蛋白酶的稳定性降低，半衰期显著缩短。 

拟盐皮质激素增多症是一种常染色体隐性遗传性疾病，可导致高血压和低血钾，糖皮质激素治疗有效。该病是由于HSD11B2基因突变所致，该基因可编码肾2型11β羟固醇脱氢酶同工酶。正常情况下，该酶可将血循环中的皮质醇灭活为较低活性的代谢产物皮质酮，而基因的失活性突变可导致肾皮质醇浓度升高。皮质醇浓度较高时可激活盐皮质激素受体，从而产生类醛固酮效应，出现低钾血症、高血压和高钠血症等。其他疾病，如Liddle综合征，也可表现出拟盐皮质激素增多症的相似症状，可通过计算尿游离皮质醇/尿游离皮质酮比值做出诊断，由于拟盐皮质激素增多症患者的皮质酮水平降低，因此该值较正常人偏高。另外，还可以通过患者对于留钾类利尿剂的反应对这两种综合征做鉴别诊断，Liddle综合征的患者只对与上皮钠离子通道结合的利尿剂有效，而拟盐皮质激素增多症的患者除了该类利尿剂，还可通过盐皮质激素受体结合剂被纠正。 拟盐皮质激素增多症极为罕见，目前世界范围内报道的病例不超过100例。 

(原文：

Apparent mineralocorticoid excess syndrome