[发明专利]一种抗弓形虫单克隆抗体及其制备方法与应用有效
申请号: | 201410613919.8 | 申请日: | 2014-11-04 |
公开(公告)号: | CN104387470A | 公开(公告)日: | 2015-03-04 |
发明(设计)人: | 童钦;张星星;姚志东;刘可心;高强;尹卫东 | 申请(专利权)人: | 北京科兴生物制品有限公司 |
主分类号: | C07K16/20 | 分类号: | C07K16/20;C12N5/20;G01N33/577;G01N33/569;A61K39/395;A61P33/02 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100085 北京市海淀区上地*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 弓形虫 单克隆抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种制备抗弓形虫单克隆抗体的方法,其特征在于,采用人胚肺成纤维细胞培养弓形虫,收获的弓形虫纯化后免疫小鼠。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,人胚肺成纤维细胞长成单层后弃掉原培养基,换用含1%~3%新生牛血清MEM培养基,接种弓形虫,接种MOI为0.1~0.5,培养弓形虫5~9天后,待细胞CPE达到80%以上时,收获弓形虫。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,对收获的弓形虫通过蔗糖梯度离心进行纯化:对收获的弓形虫灭活后静置,去除细胞及细胞团;加入低糖,再加入高糖,低糖和高糖的体积比为1:1,其中低糖的质量分数为15%~20%,高糖的质量分数为50%~55%,10000g~20000g离心30min~60min。
4.一种抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株,其保藏编号为CGMCC No.9559。
5.权利要求4所述杂交瘤细胞株在制备检测弓形虫试剂盒中的应用。
6.由权利要求4所述杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。
7.一种用于检测弓形虫或其抗体的试剂盒,其特征在于,含有权利要求6所述的单克隆抗体。
8.含有权利要求6所述单克隆抗体的检测试剂。
9.权利要求4所述的杂交瘤细胞株或权利要求6所述的单克隆抗体在制备预防或治疗弓形虫药物中的应用。
10.一种非疾病诊断目的的检测弓形虫的方法,其特征在于,采用保藏编号为CGMCC No.9559的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行检测。
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