[发明专利]一种疫苗组合物及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201410623350.3 申请日: 2014-11-06
公开(公告)号: CN105617373B 公开(公告)日: 2019-07-09
发明(设计)人: 张许科;孙进忠;王生富;田克恭 申请(专利权)人: 普莱柯生物工程股份有限公司
主分类号: A61K39/102 分类号: A61K39/102;A61P31/04
代理公司: 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 代理人: 韩登营
地址: 471000 *** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 疫苗 组合 及其 制备 方法 应用
【说明书】:

发明提供了一种疫苗组合物,该疫苗组合物包括免疫量的副猪嗜血杆菌TbpA、CdtB、OmpP2、VtaA抗原蛋白以及药学上的载体。本发明的疫苗组合物对副猪嗜血杆菌血清4型、5型、12型有交叉保护效果,能够有效预防和治疗多种血清型副猪嗜血杆菌的感染。该疫苗组合物每次免疫1ml即可得到有效的免疫。本发明还提供了该疫苗组合物的制备方法,采用该制备方法能够该疫苗组合物的产业化生产,经济可靠。

技术领域

本发明属于兽用生物制品领域,具体地涉及一种预防和治疗副猪嗜血杆菌相关疾病的疫苗组合物、制备方法及应用。

背景技术

副猪嗜血杆菌病是副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)引起的猪的多发性浆膜炎和关节炎,该病又称为猪革拉泽氏病(Glsser’s Disease)。在大量分离副猪嗜血杆菌的基础上,发现该菌的血清型复杂多样,按Kieletein-Rapp-Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法,至少可将副猪嗜血杆菌分为15个血清型;根据我国血清流行病学调查和分离菌株的鉴定,以4、5型最为流行。

采用疫苗进行免疫预防是国内外控制副猪嗜血杆菌病的根本手段,而市场销售的商品疫苗只有副猪嗜血杆菌病灭活疫苗(血清4型MD0322+血清5型SH0165)、副猪嗜血杆菌病灭活疫苗(Z-1517株)、副猪嗜血杆菌病灭活疫苗(血清1型SV1+血清6型SV6),这些疫苗的应用起到了一定的预防作用,但这些灭活疫苗一般由2个或者3个血清型的地方流行菌株制备而成,随着病原流行株和不同血清型之间缺乏交叉保护已经使现有疫苗很难达到预期的免疫效果,而且市售商品疫苗需多次免疫,成本较高,对猪只的应激较大,因此,需要发明一种新型的能有效抵抗多种血清型的副猪嗜血杆菌毒株的疫苗以解决上述问题。

发明内容

为了解决现有技术的不足,本发明的主要目的在于克服现有技术缺陷,提供一种用于预防和/或治疗副猪嗜血杆菌病的疫苗组合物,包含四种副猪嗜血杆菌免疫保护性抗原和佐剂。

本发明的第一方面在于一种疫苗组合物,其中,所述疫苗组合物包括免疫量的副猪嗜血杆菌TbpA、CdtB、OmpP2、VtaA抗原蛋白以及药学上的载体。

本发明提供的预防和/或治疗副猪嗜血杆菌病的疫苗组合物包含的副猪嗜血杆菌免疫保护性抗原为TbpA、CdtB、OmpP2、VtaA蛋白。

本发明从副猪嗜血杆菌地方分离株ZJ菌株(菌株来源参见实施例1)中分别克隆到TbpA、CdtB、OmpP2、VtaA基因。经过测序发现TbpA、CdtB、OmpP2、VtaA蛋白基因编码区分别由2703bp、834bp、1077bp和2862bp个碱基组成,具有序列表SEQ ID NO:1~4所示的核苷酸序列。经过序列分析发现其编码的蛋白rTbpA、rCdtB、rOmpP2、rVtaA分别有901、278、359、954个氨基酸残基组成,具有序列表SEQ ID NO:5~8所示的氨基酸序列,去掉信号肽部分之后表达蛋白预计分子量大小为11、33、43、11KDa。通过原核表达和实验室试验证实本发明的rTbpA、rCdtB、rOmpP2、rVtaA蛋白,能够对副猪嗜血杆菌感染具有保护作用,且意外的发现四种蛋白可以对血清4型、5型、12型具有交叉保护,预示着可以研制副猪嗜血杆菌亚单位疫苗。

本发明提供的上述基因序列是副猪嗜血杆菌的具有免疫原性的四种蛋白基因(TbpA、CdtB、OmpP2、VtaA),该蛋白还可以应用对于副猪嗜血杆菌亚单位疫苗和诊断试剂研制中。

作为本发明的一种实施方式,在本发明的疫苗组合物中,所述副猪嗜血杆菌TbpA蛋白序列为SEQ ID NO:5编码的氨基酸序列;所述副猪嗜血杆菌CdtB蛋白序列为SEQ IDNO:6编码的氨基酸序列;所述副猪嗜血杆菌OmpP2蛋白序列为SEQ ID NO:7编码的氨基酸序列;所述副猪嗜血杆菌VtaA蛋白序列为SEQ ID NO:8编码的氨基酸序列。

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