[发明专利]黄氏响声丸制剂的质量控制方法

权利要求书

1.一种黄氏响声丸制剂的检测方法，其特征在于，包括以下成分的检测，游离蒽醌与结合蒽醌，连翘苷、阿魏酸和甘草酸，所述方法为高效液相色谱法，包括对照品溶液的制备，供试品溶液的制备，阴性对照溶液的制备，将对照品溶液，供试品溶液，阴性对照溶液注入色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图计算它们的含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中所述游离蒽醌与结合蒽醌的检测方法，步骤如下：

对照品溶液的制备：取芦荟大黄素对照品适量精密称定，加甲醇制成每1ml含0.03mg的对照品溶液，取大黄素对照品适量精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的对照品溶液，取大黄酸对照品适量精密称定，加DMSO溶解后加甲醇制成每1ml含0.06mg的对照品溶液，取大黄酚对照品适量精密称定，加氯仿溶解后加甲醇制成每1ml含0.08mg的对照品溶液.取大黄素甲醚对照品适量精密称定，加氯仿溶解后加甲醇制成每1ml含0.03mg的对照品溶液，

供试品溶液的制备：取1g黄氏响声丸加入体积比为5:1-1:1甲醇-盐酸混合液40-80ml后超声提取，取滤液用15-80ml氯仿萃取2-4次；合并氯仿层，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，游离蒽醌样品：取1g黄氏响声丸加入30-100ml氯仿后回流提取30-60min，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，

阴性对照溶液的制备：取缺大黄药材的黄氏响声丸1g加入体积比为5:1-1:1甲醇-盐酸混合液40-80ml后超声提取，取滤液用15-80ml氯仿萃取2-4次；合并氯仿层，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，游离蒽醌样品：取1g黄氏响声丸加入30-100ml氯仿后回流提取30-60min，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，

测定：分别吸取上述对溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，根据色谱图计算分别计算芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的游离型及总蒽醌含量，

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以30-70:70-30的乙腈-0.32％磷酸水溶液为流动相洗脱，检测波长为254nm，理论塔板数按大黄酚计算应不低于2000。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中所述连翘苷的检测方法，步骤如下：

对照品溶液的制备：取连翘苷对照品适量精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的对照品溶液，

供试品溶液的制备：取1g黄氏响声丸加入10-50ml甲醇后超声20-40min处理，过滤，取续滤液蒸至近干，取续滤液5-15ml加中性氧化铝0.5-3g拌匀，挥干，加在中性氧化铝柱(3-9g)上，用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用流动相溶解，转移至容量瓶中定容即得，

阴性对照溶液的制备：取缺连翘药材的黄氏响声丸，加入10-50ml甲醇后超声20-40min处理，过滤，取续滤液蒸至近干，取续滤液5-15ml加中性氧化铝0.5-3g拌匀，挥干，加在中性氧化铝柱(3-9g)上，用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用流动相溶解，转移至容量瓶中定容即得，

测定：分别精密移取相同体积量的上述溶液进样，所吸取的体积量为10ul，根据色谱图计算供试品中的连翘苷含量，

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以16-26:84-74的乙腈-水为流动相，检测波长为277nm，理论塔板数按连翘苷计算应不低于2000。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中所述阿魏酸的检测方法，步骤如下：

对照品溶液的制备：取阿魏酸对照品适量精密称定，加70％甲醇制成每1ml含0.05mg的对照品溶液，

供试品溶液的制备：取1g黄氏响声丸加入10-50ml70％甲醇溶液后超声5-30min处理，过滤，取续滤液即得，

阴性对照溶液的制备：取缺川芎药材的黄氏响声丸，加入10-50ml70％甲醇溶液后超声5-30min处理，过滤，取续滤液即得，

测定：分别精密移取相同体积量的上述溶液进样，所吸取的体积量为10ul，根据色谱图计算供试品中的阿魏酸含量，

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以10-30:90-70的甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相，检测波长为321nm，理论塔板数按阿魏酸计算应不低于2000。