[发明专利]黄氏响声丸制剂的质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及黄氏响声丸制剂的质量控制方法。

技术背景

黄氏响声丸是根据著名喉科老中医黄莘农主任医师奉献的九代祖传秘方研制而成，可用于治疗急、慢性喉炎、声带小结、声带息肉初起、便秘等证。其质量标准收载于《中国药典》2010版一部第1064页，其中鉴别试验包括大黄、川芎、甘草，含量测定检测浙贝母中的贝母素甲和贝母素乙。

我国传统中药及中药制剂其质量控制方法多为显微鉴别、薄层鉴别与单一成分类型的含量测定，无法准确而全面的控制产品质量。中药制剂的多种成分及各种赋形剂会对质量检测带来多方面的干扰，样品的前处理程序若不进行科学的验证很可能会造成不准确的试验结果。所以寻找灵敏、准确、快捷和全面控制质量的检测方法，成为中药质量控制的关键。

本发明就是针对上述情况，在现有国家药典标准的基础上，利用液相色谱，制定了黄氏响声丸中主要非挥发性成分的质量控制方法。该制剂处方包括浙贝母、薄荷、酒大黄、连翘、川芎、蝉蜕、胖大海、儿茶、桔梗、诃子肉、甘草和薄荷脑十二种原材料中的有效成分。经查阅药典标准和文献药理资料，结合制剂中非挥发性成分的含量高低、药理活性及工艺生产中实际可操作性，本发明在已有的薄层色谱鉴别的基础上，采用高效液相色谱法对制剂中非挥发性成分进行含量控制，经过色谱条件的筛选，建立了酒大黄、连翘、川芎、甘草共四味药材有效成分的含量检测方法，对酒大黄中具有抗菌消炎疗效的游离蒽醌进行定量测定，还对结合蒽醌进行指标限制，兼顾了黄氏响声丸泻下的功效；对处方中抗炎抗菌效果极佳的连翘苷、阿魏酸和甘草酸进行含量测定，保证黄氏响声丸对急慢性咽喉炎的治疗效果。

发明内容

本发明公开了一种黄氏响声丸制剂的检测方法，其特征在于，包括以下成分的检测，游离蒽醌与结合蒽醌，连翘苷、阿魏酸和甘草酸，所述方法为高效液相色谱法，包括对照品溶液的制备，供试品溶液的制备，阴性对照溶液的制备，将对照品溶液和供试品溶液，阴性对照溶液注入谱仪测定，得到色谱图，根据色谱 图计算它们的含量。

其中所述游离蒽醌与结合蒽醌的检测方法，步骤如下：

对照品溶液的制备：取芦荟大黄素对照品适量精密称定，加甲醇制成每1ml含0.03mg的对照品溶液，取大黄素对照品适量精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的对照品溶液，取大黄酸对照品适量精密称定，加DMSO溶解后加甲醇制成每1ml含0.06mg的对照品溶液，取大黄酚对照品适量精密称定，加氯仿溶解后加甲醇制成每1ml含0.08mg的对照品溶液.取大黄素甲醚对照品适量精密称定，加氯仿溶解后加甲醇制成每1ml含0.03mg的对照品溶液，

供试品溶液的制备：取1g黄氏响声丸加入体积比为5:1-1:1甲醇-盐酸混合液40-80ml后超声提取，取滤液用15-80ml氯仿萃取2-4次；合并氯仿层，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，游离蒽醌样品：取1g黄氏响声丸加入30-100ml氯仿后回流提取30-60min，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，

阴性对照溶液的制备：取缺大黄药材的黄氏响声丸1g加入体积比为5:1-1:1甲醇-盐酸混合液40-80ml后超声提取，取滤液用15-80ml氯仿萃取2-4次；合并氯仿层，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，游离蒽醌样品：取1g黄氏响声丸加入30-100ml氯仿后回流提取30-60min，回收氯仿，用甲醇溶解残渣，定容后即得，

测定：分别吸取上述对溶液各10ul，注入液相色谱仪测定，根据色谱图计算分别计算芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的游离型及总蒽醌含量，

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以30-70:70-30的乙腈-0.32％磷酸水溶液为流动相洗脱，检测波长为254nm，理论塔板数按大黄酚计算应不低于2000。

其中所述连翘苷的检测方法，步骤如下：

对照品溶液的制备：取连翘苷对照品适量精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的对照品溶液，

供试品溶液的制备：取1g黄氏响声丸加入10-50ml甲醇后超声20-40min处理，过滤，取续滤液蒸至近干，取续滤液5-15ml加中性氧化铝0.5-3g拌匀，挥干，加在中性氧化铝柱(3-9g)上，用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干， 残渣用流动相溶解，转移至容量瓶中定容即得，