[发明专利]一种多抗霉素发酵培养基及发酵方法在审
申请号: | 201410624720.5 | 申请日: | 2014-11-07 |
公开(公告)号: | CN105624243A | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
发明(设计)人: | 周贤龙;石怀月;刘静 | 申请(专利权)人: | 牡丹江佰佳信生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12R1/465 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 157013 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多抗 霉素 发酵 培养基 方法 | ||
技术领域
本发明涉及发酵技术领域,具体的,涉及一种多抗霉素发酵培养 基及发酵方法。
背景技术
多抗霉素属于广谱性抗生素类,具有较好的内吸传导作用,其作 用机制是干扰菌细胞壁几丁质的生物合成,芽管和菌丝体接触药剂 后,局部膨大,破裂,溢出细胞内含物,而不能正常发育,导致死亡, 还有抑制病菌产孢和病斑扩大作用,该药对动物没有毒性,对植物没 有药害。主要防治对象有小麦白粉病,烟草赤星病,黄瓜霜霉病,瓜 类枯萎病,人参黑斑病,黄瓜灰霉病,苹果斑点落叶病,草莓及葡萄 灰霉病,林木枯梢及梨黑斑病等多种真菌病害。
目前工业生产中,多利用唐德链霉菌发酵生产多抗菌素。唐德链 霉菌发酵培养多抗霉素的培养基一般使用玉米淀粉作为碳源,在玉米 淀粉中的淀粉含有直链或支链结构,发酵过程中,发酵菌需要先将直 链和支链分解为单糖之后才能够进行利用。此外,玉米淀粉中还含有 纤维素,但是会有一部分纤维素被木质素以及半纤维素包裹着,很难 分解利用,因此往往导致原料不能够被充分的利用,造成了底物的浪 费也影响了产量的提高。因此有必要提供一种新的多抗霉素发酵培养 基以提高多抗霉素的发酵产量和原料的利用率。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷,提供一种多 抗霉素发酵培养基及发酵方法,以提高利用唐德链霉菌发酵生产多抗 霉素的过程中原料玉米淀粉的利用率,提高多抗霉素的发酵产量。
本发明提供了一种多抗霉素发酵培养基,所述发酵培养基含有: 活化处理的玉米淀粉8-11g/L,豆饼粉18-22g/L,酵母粉4-6g/L,氯 化钠4-6g/L,硫酸铵0.8-1.2g/L,碳酸钙1.8-2.2g/L;
其中,所述活化处理的玉米淀粉是用浓度为0.08-0.12mol/L的碱 溶液或者浓度为0.08-0.12mol/L的酸溶液对玉米淀粉进行浸洗获得 的。
可选的,所述碱为氢氧化钠或氢氧化钾,优选的,所述碱为氢氧 化钠。
可选的,所述酸为盐酸、硫酸、硝酸或磷酸,优选的,所述酸为 盐酸。
可选的,相对于10g的玉米淀粉,碱溶液的用量为0.06-0.1L, 浸洗时间为100-140min,碱溶液的温度为30-50℃。
可选的,相对于10g的玉米淀粉,酸溶液的用量为0.06-0.08L, 浸洗时间为50-70min,酸溶液的温度为30-50℃。
可选的,所述活化处理步骤还包括在用碱或酸对玉米淀粉进行浸 洗后获得预处理浆液,用70-80℃的热水对所述预处理浆液进行抽滤 后在75-85℃下烘干获得活化处理的玉米淀粉。
在本发明所提供的培养基中,由于玉米淀粉经过了活化处理,破 坏了淀粉的直链和支链结构、将被木质素和半纤维素包裹的纤维素暴 露出来,因此能够显著提高发酵培养基中原料的利用率,缩短发酵时 间。
本发明还提供了一种利用本发明所述的发酵培养基对唐德链霉 (Streptomycestandae)菌进行发酵培养获得多抗霉素的方法。
所述方法可以包括以下步骤:
(1)用浓度为0.08-0.12mol/L的碱溶液浸洗玉米淀粉 100-140min或用浓度为0.08-0.12mol/L的酸溶液浸洗玉米淀粉 50-70min后获得预处理浆液,用70-80℃的热水对所述预处理浆液进 行抽滤后在75-85℃下烘干获得活化处理的玉米淀粉;
其中,所述碱溶液和酸溶液的温度为30-50℃。
(2)将活化处理的玉米淀粉、豆饼粉、酵母粉、氯化钠、硫酸 铵和碳酸钙按比例接触混匀获得发酵培养基;
(3)在发酵培养基中接种产多抗霉素的链霉菌株后,在25-30℃、 200-240rpm条件下发酵培养2.5-3.5天,收集发酵清液提纯获得多抗 霉素。
可选的,所述唐德链霉菌的接种量为4-5%。
利用本发明所提供的发酵方法,能够使得发酵菌株对发酵培养基 的利用率提高,利用率可以达到80%以上,平均能够缩短约5h的发酵 时间,显著提高发酵清液中多抗霉素的含量,一般的,发酵清液中多 抗霉素的效价不低于26000μg/ml。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明进行详细的说明。
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