[发明专利]一种利用叶绿素荧光参数Fv/Fm确定产油微藻收获时间的方法

权利要求书

1.一种利用叶绿素荧光参数Fv/Fm确定产油微藻收获时间的方法，其步骤是：

1)产油微藻常规培养及胁迫诱导：进行产油微藻的的常规自养培养；将微藻培养至对数生长中期或后期时，进行胁迫条件处理诱导中性脂积累；

所述的常规自养培养条件为根据使用产油微藻种类选择自养液体培养基，在温度20-25℃,光强40-100μmol m^-2s^-1，连续光照条件下通气培养；

所述的自养液体培养基为BG11培养基、TAP培养基、Dunaliella培养基、F/2培养基和Chu10培养基；

2)叶绿素荧光参数Fv/Fm检测：胁迫条件诱导产油过程中每22－26小时取样两份，其中一份调节OD₇₀₀为1.5-2.0，体积为2－4mL，测定叶绿素荧光参数Fv/Fm；

3)中性脂含量检测：另一份藻样体积为1－2mL，12000g离心收集沉淀，氯仿/甲醇萃取的方法提取藻油，薄层层析色谱法结合图像分析软件ImageJ测定中性脂含量；

4)产油微藻采收时间的确定：细胞内中性脂开始显著积累1-2天后，进行微藻的采收，根据测定的Fv/Fm和中性脂含量使用数据统计分析软件SPSS 13进行相关性分析，二者存在显著性相关，中性脂开始积累后1-2天的Fv/Fm范围为Fv/Fm采收范围，此后进行相同胁迫条件诱导中性脂生产时，藻液Fv/Fm达到Fv/Fm采收范围时为微藻的采收时间。

2.根据权利要求1所述的一种利用叶绿素荧光参数Fv/Fm确定产油微藻收获时间的方法，其特征在于：所述的步骤1)中所述的产油微藻为小球藻、衣藻、杜氏藻、微绿球藻、眼点拟微绿球藻、葡萄藻、栅藻、菱形藻和三角褐指藻其中的任何一种。

3.根据权利要求1所述的一种利用叶绿素荧光参数Fv/Fm确定产油微藻收获时间的方法，其特征在于：所述的步骤1)中胁迫条件为营养胁迫条件。

4.根据权利要求3所述的一种利用叶绿素荧光参数Fv/Fm确定产油微藻收获时间的方法，其特征在于：所述的营养胁迫条件为缺氮胁迫条件。