[发明专利]一种microRNA比色传感器的制备与应用有效
| 申请号： | 201410629839.1 | 申请日： | 2014-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN104404140A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 丁世家;李丹丹;程伟;颜玉蓉;袁泰先;张晔;李胜强;丁小娟;袁睿;吴茳铃 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人： | 郭婧婧 |
| 地址： | 400016*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 microrna 比色 传感器 制备 应用 | ||
1.一种检测miRNA的比色传感器，包括扩增反应体系和催化反应体系，所述扩增反应体系中包括针对miRNA的茎环模板、哑铃状滚环模板、具有链置换活性的DNA聚合酶、限制性核酸内切酶、dNTP、缓冲体系。
2.根据权利要求1所述的比色传感器，其特征在于，所述扩增反应体系中，所述茎环模板是由分子信标MB和功能核酸GDNA杂交获得的MB/GDNA，所述分子信标MB的序列如SEQ ID NO.1所示，所述功能核酸GDNA的序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根据权利要求2所述的比色传感器，其特征在于，所述分子信标MB和功能核酸GDNA的摩尔比例为1:1～1.6:1。
4.根据权利要求1所述的比色传感器，其特征在于，所述扩增反应体系中，所述茎环模板的终浓度为0.1～5μM。
5.根据权利要求1所述的比色传感器，其特征在于，所述哑铃状滚环模板的序列如SEQ ID NO.3。
6.根据权利要求1所述的比色传感器，其特征在于，所述扩增反应体系中，哑铃状滚环模板的终浓度为100ng/μL～600ng/μL。
7.根据权利要求1所述的比色传感器，其特征在于，所述扩增反应体系中，所述具有链置换活性的DNA聚合酶是Phi29DNA Polymerase；所述限制性核酸内切酶是Nb.BbvCI；所述缓冲体系选自Phi29DNA Polymerase Buffer和Cutsmart buffer。
8.根据权利要求1所述的比色传感器，其特征在于，所述催化反应体系包括Hemin、ABTS2-和H2O2。
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