[发明专利]一种具有血小板聚集抑制功能的抗HIV白纹伊蚊蛋白及其制备方法有效
| 申请号： | 201410636317.4 | 申请日： | 2014-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN104356220A | 公开（公告）日： | 2015-02-18 |
| 发明（设计）人： | 徐学清;李琳;刘叔文 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/70;C07K1/18;C07K1/16;A61P31/18 |
| 代理公司： | 广州市天河庐阳专利事务所 44244 | 代理人： | 胡济元 |
| 地址： | 510515 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 血小板 聚集 抑制 功能 hiv 白纹伊蚊 蛋白 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种具有血小板聚集抑制功能的抗HIV白纹伊蚊蛋白，该蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示的序列。
2.一种权利要求1所述具有血小板聚集抑制功能的抗HIV白纹伊蚊蛋白的制备方法，该方法由以下步骤组成:
(1)提取白纹伊蚊唾液腺总RNA后用PROMEGA公司的mRNA Isolation Systems试剂盒分离纯化mRNA和利用CLONTECH公司CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit质粒cDNA文库构建试剂盒扩增出白纹伊蚊唾液腺总cDNA，然后采用SEQ ID NO：2所示的上游引物和SEQ ID NO：3所示的下游引物扩增编码SEQ ID NO：4所示的抗HIV白纹伊蚊蛋白的基因，然后先将该基因克隆到pET-17b表达载体中，再转化到BL21(DE3)pLysS大肠杆菌中重组表达，并收集目的条带在28-37kDa间的包涵体；
(2)将所收集的包涵体盐酸胍溶解、复性折叠后依次上Sephadex SR-100凝胶过滤柱、Hiprep SP阳离子交换色谱柱、Sephadex G75凝胶过滤柱和Sephadex G75凝胶过滤柱层析，得到如SEQ ID NO：1所示序列的白纹伊蚊唾液腺基因重组表达蛋白。
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