[发明专利]一种抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体酶联免疫测定试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体酶联免疫测定试剂盒，包括：

1)重组乙型肝炎病毒x蛋白；

2)抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体阴、阳性对照品；

3)酶标记结合物；

4)显色底物；

5)浓缩洗涤液。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述重组乙型肝炎病毒x蛋白序列如SEQ ID No.1所示。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，包被所述重组乙型肝炎病毒x蛋白的固相载体为微孔板。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标记结合物为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的检测抗体。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述显色底物为3,3',5,5'-四甲基联苯胺。

6.权利要求1-5任一项所述的试剂盒在检测抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体中的应用。

7.权利要求1-5任一项所述的试剂盒在制备用于肝癌诊断的试剂盒中的应用。

8.一种制备权利要求1-5所述试剂盒的方法，其特征在于包括以下步骤:

1)通过原核载体表达重组乙型肝炎病毒x蛋白；

2)制备包被所述重组乙型肝炎病毒x蛋白的固相载体；

3)以抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体阴、阳性血清制备对照品；

4)以酶标记检测抗体；

5)配制显色底物；

6)配制浓缩洗涤液；

7)分装所述抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体阴、阳性对照品、酶标记结合、显色底物及浓缩洗涤液；

8)组装为成品。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，制备包被所述重组乙型肝炎病毒x蛋白的固相载体的步骤2)采用以下方法:

1)包被：用0.02M PH值为8.5的磷酸缓冲液配制成所需浓度的所述重组乙型肝炎病毒x蛋白包被液，并将包被液负载于固相载体上；

2)封闭：用含5％酪蛋白或5％脱脂奶粉PH值为6.8-7.3，浓度为0.01M的磷酸盐缓冲液作为封闭液封闭所述固相载体。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述包被重组乙型肝炎病毒x蛋白的固相载体为微孔板、塑料珠、塑料管。

11.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述酶为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的检测抗体；所述显色底物为3,3',5,5'-四甲基联苯胺。

12.一种用于肝癌诊断的定量检测试剂盒，包括相互独立的抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体定量检测单元和甲胎蛋白定量检测单元。

13.如权利要求12所述的试剂盒，其特征在于，所述抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体定量检测单元至少包括包被抗乙型肝炎病毒x蛋白的固相载体和抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体阴、阳性对照品；所述甲胎蛋白定量检测单元至少包括包被甲胎蛋白抗体的固相载体和甲胎蛋白阴、阳性对照品。

14.如权利要求12所述的试剂盒，其特征在于，所述抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体定量检测单元是如权利要求1-4所述的抗乙型肝炎病毒x蛋白抗体酶联免疫测定试剂盒。

15.如权利要求12-14所述的试剂盒在制备用于肝癌诊断的免疫测定试剂盒中的应用。