[发明专利]抗人脂联素的单克隆抗体及其应用有效

专利信息
申请号: 201410637736.X 申请日: 2014-11-06
公开(公告)号: CN104694478B 公开(公告)日: 2018-06-26
发明(设计)人: 黎明;邱贵兴;范中杰;王颖;阴津华;徐璐 申请(专利权)人: 中国医学科学院北京协和医院
主分类号: C12N5/20 分类号: C12N5/20;C07K16/24;G01N33/68;G01N33/577;C12R1/91
代理公司: 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 代理人: 郭广迅
地址: 100730 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 单克隆抗体 人脂 杂交瘤细胞株 总脂 保藏 脂联素 尿液 脂肪细胞培养 定性检测 检测试剂 检测唾液 生物样本 特异性强 质地均一 关节液 灵敏度 试剂盒 检测 乳汁 调控 应用
【权利要求书】:

1.抗人脂联素单克隆抗体A25和C63在制备用于在生物样本中定量和/或定性检测人脂联素分子的试剂盒中的应用;

其中,所述抗人脂联素单克隆抗体A25由保藏号为CGMCC No.9568的杂交瘤细胞株C2001产生;

所述抗人脂联素单克隆抗体C63由保藏号为CGMCC No.9908的杂交瘤细胞株6C3-Ⅰ产生;

其中,所述试剂盒使用单克隆抗体C63作为固相抗体,A25作为标记抗体。

2.根据权利要求1所述的应用,其中,所述人脂联素分子为人总脂联素分子。

3.根据权利要求2所述的应用,其中,所述人总脂联素分子为不同聚合形式的人脂联素分子。

4.根据权利要求3所述的应用,其中,所述人总脂联素分子的聚合形式为低分子的三聚体、中分子六聚体和高分子12-18聚体或更高聚体。

5.根据权利要求1所述的应用,其中,所述生物样本为生物学液体样本。

6.根据权利要求5所述的应用,其中,所述生物样本选自血清/浆、唾液、脑脊液、关节液、乳汁、组织细胞提取液或细胞培养上清。

7.根据权利要求1所述的应用,其中,所述检测的方法为半定量的非变性凝胶电泳免疫印迹法或定量的ELISA法。

8.根据权利要求7所述的应用,其中,所述ELISA法包括以下步骤:

(1)进行夹心结合试验,在单克隆抗体A25和C63中选择最佳配对单克隆抗体;

(2)将单克隆抗体C63作为固相抗体,使用酶标板包被,单克隆抗体A25作为标记抗体,使用生物素标记;

(3)加入酶标亲和素,检测被结合的标记。

9.根据权利要求8所述的应用,其中,所述生物样本为生物学液体样本。

10.根据权利要求9所述的应用,其中,所述生物样本选自血清/浆、唾液、脑脊液、关节液、乳汁、组织细胞提取液或细胞培养上清。

11.抗人脂联素单克隆抗体A25和C63在制备用于在组织/细胞中检测人脂联素蛋白表达的试剂盒中的应用;

其中,所述抗人脂联素单克隆抗体A25由保藏号为CGMCC No.9568的杂交瘤细胞株C2001产生;

所述抗人脂联素单克隆抗体C63由保藏号为CGMCC No.9908的杂交瘤细胞株6C3-Ⅰ产生;

其中,所述试剂盒使用单克隆抗体C63作为固相抗体,A25作为标记抗体。

12.根据权利要求11所述的应用,其中,所述试剂盒为用于免疫组化法的试剂盒。

13.根据权利要求12所述的应用,所述组织/细胞为培养的细胞或组织活检样本。

14.一种检测人总脂联素的试剂盒,所述试剂盒中包含抗人脂联素单克隆抗体A25和C63;

其中,所述抗人脂联素单克隆抗体A25由保藏号为CGMCC No.9568的杂交瘤细胞株C2001产生;

所述抗人脂联素单克隆抗体C63由保藏号为CGMCC No.9908的杂交瘤细胞株6C3-Ⅰ产生;

其中,所述试剂盒使用单克隆抗体C63作为固相抗体,A25作为标记抗体。

15.根据权利要求14所述的试剂盒,其中,所述试剂盒为ELISA试剂盒。

16.根据权利要求15所述的试剂盒,其中,所述ELISA试剂盒中的ELISA采用双抗体夹心的非竞争结合法。

17.根据权利要求16所述的试剂盒,其中,所述ELISA中引入BA放大系统。

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