[发明专利]抗人脂联素的单克隆抗体及其应用有效
申请号: | 201410637736.X | 申请日: | 2014-11-06 |
公开(公告)号: | CN104694478B | 公开(公告)日: | 2018-06-26 |
发明(设计)人: | 黎明;邱贵兴;范中杰;王颖;阴津华;徐璐 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院北京协和医院 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/24;G01N33/68;G01N33/577;C12R1/91 |
代理公司: | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人: | 郭广迅 |
地址: | 100730 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单克隆抗体 人脂 杂交瘤细胞株 总脂 保藏 脂联素 尿液 脂肪细胞培养 定性检测 检测试剂 检测唾液 生物样本 特异性强 质地均一 关节液 灵敏度 试剂盒 检测 乳汁 调控 应用 | ||
1.抗人脂联素单克隆抗体A25和C63在制备用于在生物样本中定量和/或定性检测人脂联素分子的试剂盒中的应用;
其中,所述抗人脂联素单克隆抗体A25由保藏号为CGMCC No.9568的杂交瘤细胞株C2001产生;
所述抗人脂联素单克隆抗体C63由保藏号为CGMCC No.9908的杂交瘤细胞株6C3-Ⅰ产生;
其中,所述试剂盒使用单克隆抗体C63作为固相抗体,A25作为标记抗体。
2.根据权利要求1所述的应用,其中,所述人脂联素分子为人总脂联素分子。
3.根据权利要求2所述的应用,其中,所述人总脂联素分子为不同聚合形式的人脂联素分子。
4.根据权利要求3所述的应用,其中,所述人总脂联素分子的聚合形式为低分子的三聚体、中分子六聚体和高分子12-18聚体或更高聚体。
5.根据权利要求1所述的应用,其中,所述生物样本为生物学液体样本。
6.根据权利要求5所述的应用,其中,所述生物样本选自血清/浆、唾液、脑脊液、关节液、乳汁、组织细胞提取液或细胞培养上清。
7.根据权利要求1所述的应用,其中,所述检测的方法为半定量的非变性凝胶电泳免疫印迹法或定量的ELISA法。
8.根据权利要求7所述的应用,其中,所述ELISA法包括以下步骤:
(1)进行夹心结合试验,在单克隆抗体A25和C63中选择最佳配对单克隆抗体;
(2)将单克隆抗体C63作为固相抗体,使用酶标板包被,单克隆抗体A25作为标记抗体,使用生物素标记;
(3)加入酶标亲和素,检测被结合的标记。
9.根据权利要求8所述的应用,其中,所述生物样本为生物学液体样本。
10.根据权利要求9所述的应用,其中,所述生物样本选自血清/浆、唾液、脑脊液、关节液、乳汁、组织细胞提取液或细胞培养上清。
11.抗人脂联素单克隆抗体A25和C63在制备用于在组织/细胞中检测人脂联素蛋白表达的试剂盒中的应用;
其中,所述抗人脂联素单克隆抗体A25由保藏号为CGMCC No.9568的杂交瘤细胞株C2001产生;
所述抗人脂联素单克隆抗体C63由保藏号为CGMCC No.9908的杂交瘤细胞株6C3-Ⅰ产生;
其中,所述试剂盒使用单克隆抗体C63作为固相抗体,A25作为标记抗体。
12.根据权利要求11所述的应用,其中,所述试剂盒为用于免疫组化法的试剂盒。
13.根据权利要求12所述的应用,所述组织/细胞为培养的细胞或组织活检样本。
14.一种检测人总脂联素的试剂盒,所述试剂盒中包含抗人脂联素单克隆抗体A25和C63;
其中,所述抗人脂联素单克隆抗体A25由保藏号为CGMCC No.9568的杂交瘤细胞株C2001产生;
所述抗人脂联素单克隆抗体C63由保藏号为CGMCC No.9908的杂交瘤细胞株6C3-Ⅰ产生;
其中,所述试剂盒使用单克隆抗体C63作为固相抗体,A25作为标记抗体。
15.根据权利要求14所述的试剂盒,其中,所述试剂盒为ELISA试剂盒。
16.根据权利要求15所述的试剂盒,其中,所述ELISA试剂盒中的ELISA采用双抗体夹心的非竞争结合法。
17.根据权利要求16所述的试剂盒,其中,所述ELISA中引入BA放大系统。
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