[发明专利]整合子In1069

权利要求书

1.一种整合子，其特征在于，所述整合子序列如SEQ ID NO.1所示，所述整合子命名为In1069。

2.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒中包含权利要求1所述的整合子。

3.根据权利要求2所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒的制备过程中使用的载体质粒为pET32a载体。

4.一种接合细菌，其特征在于，所述接合细菌中含有权利要求1所述的整合子；所述接合细菌是由EC6335菌株与E.coli J53 AzR菌株制备。

5.一种重组细菌，其特征在于，所述重组细菌中含有权利要求1所述的整合子；所述重组细菌是将权利要求2或3所述的重组质粒转入E.coli JM109菌株中制备而成。

6.权利要求1所述的整合子的获取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)在台州市立医院重症监护室病人脓液培养阳性的标本中分离出1株对头孢吡啶、亚胺培南的细菌；

(2)将步骤(1)分离的单克隆菌株按操作程序用VITEK 2和药敏平板琼脂扩散方法，同时补充药敏纸片进行细菌鉴定及药敏试验，经鉴定此菌株为肺炎克雷伯氏菌，命名为EC6335；

(3)将EC6335菌株培养扩增，提取所述EC6335菌株的质粒；

(4)扩增经步骤(3)获取的质粒上的DNA片段，测序；

(5)利用ContigExpress Program软件进行序列拼接，得到权利要求1所述的整合子的结构。

7.一种权利要求4所述的接合细菌的制备方法，其特征在于，所述制备方法的具体操作步骤如下：将EC6335菌株与E.coli J53 AzR菌株共培养，通过含有叠氮化钠和EC6335菌株耐受药物的平板筛选接合子。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述EC6335菌株耐受药物是亚胺培南。

9.一种权利要求5所述的重组细菌的制备方法，其特征在于，所述制备方法的具体操作步骤如下：将整合子In1069克隆入pET32a载体中，然后将重组质粒转化入野生型E.coli JM109中，通过含有Amp的平板选阳性克隆。