[发明专利]一种抗氧化多肽及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种抗氧化多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为Tyr-Thr-Ile-Gln-Tyr。

2.权利要求1所述抗氧化多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)以鲢鱼鱼肉为原料，加水混合，于80～90℃水浴中静置15～20min，匀浆，得到鱼肉匀浆液；

2)在步骤1)所得鱼肉匀浆液中加入胃蛋白酶进行酶解，充分反应后，在95～100℃下保温3～5min，冷却至室温，离心，收集上清液；

3)取步骤2)所得上清液，用孔径为2500-3000道尔顿陶瓷膜进行超滤，得到含有所述抗氧化多肽的多肽溶液。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤1)所述匀浆具体为：在10000～13000rpm条件下匀浆1～3min。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2)所述酶解具体为：在pH 1.8～2.5、35～40℃的条件下反应0.25～2.0h。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2)所述离心具体为：在4000～6000g条件下离心5～10min。

6.根据权利要求2～5任意一项所述的制备方法，其特征在于，还包括对步骤3)所得多肽溶液进行纯化，纯化产物经浓缩、冷冻干燥后，即得抗氧化多肽。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述纯化包括以下步骤：使用Sephadex G-25凝胶色谱柱，以去离子水为流动相进行洗脱，收集含有所述抗氧化多肽的洗脱液。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述纯化还包括以下步骤：使用十八烷基键合硅胶色谱柱，以含有0.1％三氟乙酸的乙腈-水为流动相进行洗脱，收集含有所述抗氧化多肽的洗脱液。

9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)取鲢鱼鱼肉，加入1～3倍于鱼肉重量的水，于80～90℃水浴中静置15～20min，在10000～13000rpm条件下匀浆1～3min，得到鱼肉匀浆液；

2)在步骤1)所得鱼肉匀浆液中加入胃蛋白酶，所述胃蛋白酶与步骤1)所述鲢鱼鱼肉的质量比为1：100～300，在pH 1.8～2.5、35～40℃的条件下进行酶解，反应0.25～2.0h后，在95～100℃下保温3～5min，冷却至室温，在4000～6000g条件下离心5～10min，收集上清液；

3)取步骤2)所得上清液，利用孔径为2500-3000道尔顿陶瓷膜进行超滤，得到多肽溶液；

4)取步骤3)所得多肽溶液，浓缩，使用Sephadex G-25凝胶色谱柱，以去离子水为流动相进行洗脱，收集含有所述抗氧化多肽的洗脱液；

5)取步骤4)所得洗脱液，浓缩，使用十八烷基键合硅胶色谱柱，以含有0.1％三氟乙酸的乙腈-水为流动相进行洗脱，收集含有所述抗氧化多肽的洗脱液；浓缩，冷冻干燥，即得抗氧化多肽。

10.权利要求1所述抗氧化多肽或由权利要求2～9任意一项所述制备方法得到的抗氧化多肽的应用。