[发明专利]酵母蛋白的提取试剂

权利要求书

1.一种毕赤酵母表达的GPCR膜蛋白的提取试剂，其特征在于，由溶液A和溶液B组成；

其中，溶液A是0.1～1M KOH溶液或0.1～1M NaOH溶液；

溶液B中各组分的终浓度为20～200mM Tris-HCl、体积浓度为0.1％～3％的TritonX-100、5～40mM EDTA、0.1g/100mL～2g/100mL的SDS、2～200mMβ-巯基乙醇和1～10M尿素。

2.一种毕赤酵母表达的GPCR膜蛋白的提取方法，其特征在于，包括步骤：

酵母细胞先经过权利要求1所述的溶液A水浴处理后，收集细胞，再经过权利要求1所述的溶液B处理，得到酵母蛋白。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述提取方法，包括步骤：

1)将培养的酵母离心，收集酵母；

2)按照每克酵母湿重加入0.5～1ml水重悬菌体，得到菌体液后，加入溶液A，水浴孵育后，离心，去上清，收集酵母；

3)按照每克酵母湿重加入2～3ml溶液B，震荡，离心，得到酵母蛋白。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，离心的条件为2500～3500g离心3～8分钟；

所述步骤2)中，溶液A的加入量与菌体液的体积比为1～1.2:1；水浴孵育的条件为50～70℃，孵育时间为5～20分钟。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述溶液A的加入量与菌体液的体积比为1:1。

6.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中，震荡的条件为室温下摇床震荡20～40分钟。