[发明专利]蛋白产品的总核苷酸测定方法有效
| 申请号： | 201410654423.5 | 申请日： | 2014-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN104316621A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 许建刚;高会玲 | 申请（专利权）人： | 上海征泰饲料有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 刘菁菁 |
| 地址： | 201614 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蛋白 产品 核苷酸 测定 方法 | ||
1.蛋白产品的总核苷酸测定方法，其特征在于采用如下步骤：
(1)配制碱基混合标准液；
(2)配制待测样品的溶液，以步骤1所述的碱基混合标准液作为参照液，采用高效液相色谱法通过出峰面积比较得到样品中游离碱基的含量值，并得到游离碱基的总含量；
(3)待测样品进行完全水解处理，用高效液相色谱法定量测定完全水解后的总碱基含量；
(4)以步骤3所得的总碱基含量减去步骤2所得的游离碱基含量后经分子量换算得到核苷酸的含量。
2.根据权利要求1所述的蛋白产品的总核苷酸测定方法，其特征在于：所述步骤3中待测样品进行完全水解处理是通过以下操作实现的：
称取待测样品，置于耐压消化管中；
在耐压消化管中加入高氯酸消化液，使待测样品水解；
放入烘箱内100～110℃消化50～70min；
使用10～20％氢氧化钾溶液调pH至6.5～7.5，备用。
3.根据权利要求2所述的蛋白产品的总核苷酸测定方法，其特征在于：所述高氯酸消化液中高氯酸的质量百分比浓度为70％。
4.根据权利要求1所述的蛋白产品的总核苷酸测定方法，其特征在于：所述步骤2中测定游离碱基含量及步骤3中测定总碱基含量的色谱条件为：流动相A采用0.1mol/L磷酸二氢钾溶液，pH＝4.9～5.1；流动相B采用25％甲醇溶液。
5.根据权利要求4所述的蛋白产品的总核苷酸测定方法，其特征在于：测定总碱基含量采用如下梯度洗脱程序：
6.根据权利要求4所述的蛋白产品的总核苷酸测定方法，其特征在于：测定游离碱基含量采用如下梯度洗脱程序：
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