[发明专利]一种以HREAFP为启动子的携带Melittin基因的溶瘤腺病毒及其应用在审
| 申请号： | 201410662404.7 | 申请日： | 2014-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN104388398A | 公开（公告）日： | 2015-03-04 |
| 发明（设计）人： | 李柏;王丽娜;方凡夫;顾伟 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/861;A61K48/00;A61P35/00;A61P1/16 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 巫蓓丽 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 hreafp 启动子 携带 melittin 基因 溶瘤腺 病毒 及其 应用 | ||
1.一种以HREAFP为启动子的携带Melittin基因的溶瘤腺病毒，其特征在于，所述的溶瘤腺病毒是以HREAFP为启动子，携晚期启动子MLP调控蜂毒素基因的溶瘤腺病毒。
2.根据权利要求1所述的溶瘤腺病毒，其特征在于，所述的溶瘤腺病毒是以11型腺病毒为载体，构建以缺氧反应元件HRE启动子和甲胎蛋白启动子AFP杂合启动子共同调控Ela区，Elb区缺失55KDa，携带由晚期启动子MLP调控Melittin基因的溶瘤腺病毒。
3.根据权利要求1所述的溶瘤腺病毒，其特征在于，所述的溶瘤腺病毒的制备方法是：将携带Melittin基因的质粒pENTR-MLP-Melittin与腺病毒骨架质粒pPE3-F11B通过LR重组，构建质粒pPE3-F11B-MLP-Melittin，将其与含有杂合启动子HREAFP的质粒PXC20-△Elb-55kda-HREAFP共同转染人胚肾293细胞，得到由HREAFP调控Ela区，Elb区缺失55kda蛋白的携Melittin基因的重组增殖型腺病毒。
4.根据权利要求1所述的溶瘤腺病毒的制备方法，其特征在于，所述的制备方法是：将携带Melittin基因的质粒pENTR-MLP-Melittin与腺病毒骨架质粒pPE3-F11B通过LR重组，构建质粒pPE3-F11B-MLP-Melittin，将其与含有杂合启动子HREAFP的质粒PXC20-△Elb-55kda-HREAFP共同转染人胚肾293细胞，得到由HREAFP调控Ela区，Elb区缺失55kda蛋白的携Melittin基因的重组增殖型腺病毒。
5.根据权利要求1-3任一所述的溶瘤腺病毒在制备治疗肿瘤的药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤为肝癌。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的肝癌为甲胎蛋白阳性的肝癌。
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