[发明专利]一种低粘度、高纯度酵母甘露聚糖的制备方法

权利要求书

1.一种低粘度、高纯度酵母甘露聚糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括如下步骤：

(1)以酿酒酵母细胞壁为原料，采用水提醇沉法，得到粗品酵母甘露聚糖；

(2)采用去离子水，将步骤(1)所得粗品酵母甘露聚糖配制成溶液；

(3)向步骤(2)所得溶液中加入中性蛋白酶，进行酶解，酶解结束后，进行灭酶，得粗品酵母甘露聚糖的一次酶解液；

(4)将步骤(3)所得的一次酶解液进行离心处理；

(5)取步骤(4)所得上清，加入乙醇进行醇沉，离心收集沉淀；

(6)取步骤(5)所得沉淀，加入磷酸盐缓冲液配制成溶液，采用NaOH调节溶液pH值至7.5～8.0；

(7)取步骤(6)所得溶液，加入链霉蛋白酶，进行酶解，酶解结束后，进行灭酶，得粗品酵母甘露聚糖的二次酶解液；

(8)将步骤(7)所得二次酶解液进行离心处理；

(9)取步骤(8)所得上清，加入乙醇进行醇沉，离心收集沉淀；

(10)将步骤(9)所得沉淀采用去离子溶解，搅拌均匀至分散完全，将所述溶液采用超滤除盐，收集所得截留液；

(11)将步骤(10)所得的截留液进行喷雾干燥，即得低粘度、高纯度酵母甘露聚糖。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，采用去离子水，将步骤(1)所得粗品酵母甘露聚糖配制成15％w/v的溶液。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，中性蛋白酶的添加量为粗品酵母甘露聚糖中蛋白含量的0.05％，酶解温度为45℃，酶解时间为2h。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，离心转速为4000～5000rpm，离心时间为5～10min。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中，乙醇的用量为所得上清的二倍体积，离心转速为4000～5000rpm，离心时间为10～20min。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中，所述溶液浓度为15％w/v，磷酸盐缓冲液的浓度为0.02M～0.2M，pH为7.0；NaOH浓度为0.01M。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(7)中，链霉蛋白酶的添加量为粗品酵母甘露聚糖中蛋白含量的0.05％，酶解温度为40℃，酶解时间为8h。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(8)中，离心转速为4000～5000rpm，离心时间为5～10min。

9.根据权利要求7或8所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(9)中，乙醇的用量为所得上清的三倍体积，离心转速为4000～5000rpm，离心时间为10～20min。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(10)中，超滤采用的条件分别为分子量截留为10kDa的超滤膜、操作压力为20～25psi、料液浓度为4％～6％、操作温度为常温。