[发明专利]一种提高苏氨酸产量的发酵方法在审
申请号: | 201410666613.9 | 申请日: | 2014-11-20 |
公开(公告)号: | CN104404096A | 公开(公告)日: | 2015-03-11 |
发明(设计)人: | 李静;刘帅;邢晓丽 | 申请(专利权)人: | 河南巨龙生物工程股份有限公司 |
主分类号: | C12P13/08 | 分类号: | C12P13/08 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人: | 时国珍 |
地址: | 467500 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 苏氨酸 产量 发酵 方法 | ||
技术领域
本发明属于苏氨酸合成技术领域,具体涉及一种提高苏氨酸产量的发酵方法。
背景技术
苏氨酸是畜、禽、鱼类生长的必需氨基酸之一,在调节动物机能、维持机体健康等方面起着十分重要的作用。生物体本身不能生产苏氨酸,必须通过日常进食加以补充。苏氨酸主要采用工业微生物发酵的方法进行生产,目前各生产企业主要将菌种诱变、培养基和培养温度调整作为技术改进的方向。现有的苏氨酸的发酵方法包括以下步骤:第一步、按常规进行种子培养;第二步、进行正常的实消、接种、培养,底料中不添加抑制剂,培养过程中不流加培养基及添加抑制剂;第三步、发酵结束,提取、精制苏氨酸。但是现有的发酵法生产L-苏氨酸的工业化过程中存在产酸率低的问题,最终产酸为120-130g/L,因此研究开发新的提高苏氨酸产量的方法成为研究的热点。
发明内容
本发明的目的是提供一种提高苏氨酸产量的发酵方法,该发酵方法可以使苏氨酸产量由120-130g/L提升至140-150g/L。
本发明实现上述目的采用的技术方案是:一种提高苏氨酸产量的发酵方法,包括以下步骤:
步骤一、先进行菌种培养,然后将得到的种子液接种到发酵培养基中,进行发酵培养;所述的发酵培养基中除水外的各原料成分的添加量为:葡萄糖20-40g/L、氯化钾0.15-0.4g/L、硫酸镁0.3-0.7g/L、磷酸二氢钾1.3-2.0g/L、硫酸亚铁0.005-0.02g/L、硫酸锰0.005-0.02g/L、玉米浆3-9g/L、酵母膏1.0-1.8g/L和甜菜碱0.6-1.8g/L,并在发酵培养基中外加0.02-0.06ml/L的消泡剂和质量百分数不大于2%的抑制剂;
步骤二、在发酵培养期间,当菌体OD值达到最高值的85%-90%时向发酵培养基中再次添加抑制剂,并补充培养基成分,且添加完成后抑制剂在发酵培养基中的质量百分数为2-4%,发酵结束后进行苏氨酸的提取和精制。
所述的步骤二补充的培养基成分包括玉米浆、氯化钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸亚铁和硫酸锰,且以上组分的补充添加量分别为其在发酵培养基中添加量的20%。
步骤一和步骤二所述的抑制剂为柠檬酸钠。
本发明的有益效果
本发明提供的提高苏氨酸产量的方法针对现有发酵法生产L-苏氨酸的工业化过程中产酸率低的问题,从对苏氨酸发酵的代谢途径调控着手,首次将三羧酸循环的代谢流与苏氨酸的代谢流统筹考虑,通过抑制三羧酸循环的方法来加强苏氨酸合成的代谢流,从而加强苏氨酸的合成途径,达到提高产酸、降低成本的目的,本发明可使传统的在底料中加入所有营养成分,中间不再流加营养及添加抑制剂的发酵方法120-130g/L的苏氨酸产量提升至140-150g/L。
具体实施方式
一种提高苏氨酸产量的发酵方法,包括以下步骤:
步骤一、先进行菌种培养,然后将得到的种子液接种到发酵培养基中,进行发酵培养;所述的发酵培养基中除水外的各原料成分的添加量为:葡萄糖20-40g/L、氯化钾0.15-0.4g/L、硫酸镁0.3-0.7g/L、磷酸二氢钾1.3-2.0g/L、硫酸亚铁0.005-0.02g/L、硫酸锰0.005-0.02g/L、玉米浆3-9g/L、酵母膏1.0-1.8g/L和甜菜碱0.6-1.8g/L,并在发酵培养基中外加0.02-0.06ml/L的消泡剂和质量百分数不大于2%的抑制剂;
步骤二、在发酵培养期间,当菌体OD值达到最高值的85%-90%时向发酵培养基中再次添加抑制剂,并补充培养基成分,且添加完成后抑制剂在发酵培养基中的质量百分数为2-4%,发酵结束后进行苏氨酸的提取和精制。
所述步骤二补充的培养基成分包括玉米浆、氯化钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸亚铁和硫酸锰,且以上组分的补充添加量分别为其在发酵培养基中添加量的20%。
步骤一和步骤二所述的抑制剂为柠檬酸钠。
以下结合具体实施例对本发明做进一步说明:
实施例1:
一种提高苏氨酸产量的发酵方法,包括以下步骤:
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