[发明专利]基于聚谷氨酸与四氯四碘荧光素键合物的抗肿瘤药物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及一种基于聚谷氨酸与四氯四碘荧光素键合物的抗肿瘤药物及其制备方法和应用。

背景技术

恶性肿瘤作为一种严重危害人类的身体健康的疾病，发病率呈现逐年上升的趋势。根据卫生部肿瘤防治办公室的数据显示，近20年来，中国每4至5个死亡者中就有1个死于癌症，已成为威胁国民健康的头号杀手。我国每年癌症发病人数约260万人，死亡约180万人。

目前手术和化学疗法是治疗肿瘤的主要方法。它们都存在对身体伤害大的缺点。光动力疗法作为一种新的治疗方法，它将特定的光敏剂注入体内，光敏剂在体内会选择性地滞留于肿瘤组织内，再以光线照射后，光敏剂会吸收特定波长的光能，产生活性氧自由基，达到选择性消灭癌细胞的作用。

四氯四碘荧光素钠(也称作Rose Bengal，简称RB)作为一种荧光素衍生物，有着明显区别于荧光素的光化学性质，它将吸收的光能高效地转化为活性氧自由基，是一种良好的光敏剂。研究表明在没有光照时，此药物也有作为化疗药物的功效，其作为抗肿瘤药物已经在皮肤癌、乳腺癌和肝癌上进行临床试验。在临床试验中还发现，在部分黑色素瘤被注射药物的情况下，未被注射药物的黑色素瘤部位也表现出受抑制的现象(Thompson JF,Hersey P,Wachter E.Chemoablation of metastatic melanoma using intralesional Rose Bengal.Melanoma Res.,2008,18(6):405-411.)，而且，血液中的T细胞水平上升。这种现象表明四氯四碘荧光素钠能激活免疫系统对癌细胞的免疫反应(Toomey P,Kodumudi K,Weber A,et al.Intralesional Injection of Rose Bengal Induces a Systemic Tumor-Specific Immune Response in Murine Models of Melanoma and Breast Cancer.PLoS One,2013,8(7).)。因此，四氯四碘荧光素钠作为抗肿瘤药物有着广阔的应用前景。但其作为小分子药物有着循环时间短，不能靶向肿瘤的缺点，因此只能在局部损伤部位注射(皮肤癌)或肿瘤内注射(乳腺癌和肝癌)，严重影响了其抗肿瘤效果，限制了其临床范围。

将小分子药物抗肿瘤药物与生物相容性的高分子结合形成纳米尺寸的药物，可以增加了药物的水溶性、血液循环时间和肿瘤靶向效果，从而可以降低小分子药物的毒副作用，提高疗效。

目前还未见针对四氯四碘荧光素钠进行改造获得的药物聚合物报道。

发明内容

本发明提供了一种基于聚谷氨酸与四氯四碘荧光素键合物的抗肿瘤药物，该抗肿瘤药物的水溶性好，肿瘤靶向性好，血液循环时间长。

基于聚谷氨酸与四氯四碘荧光素键合物(PGA-RB)的抗肿瘤药物，结构式如式(Ⅰ)所示：

其中，m+n为10～500之间的整数，四氯四碘荧光素的键合率为5～30％，p为1～10之间的整数。

本发明的抗肿瘤药物中，四氯四碘荧光素的键合率(即m/(m+n)×100％)为5～30％，若键合率小于5％或超过30％，该聚谷氨酸与四氯四碘荧光素键合物均难以在水中自组装成纳米颗粒。

本发明还提供了所述抗肿瘤药物的制备方法，包括：

(1)将四氯四碘荧光素钠与带有胺基的卤代烷烃反应，生成如式(Ⅱ)所示的四氯四碘荧光素衍生物：

其中，p为1～10之间的整数；

具体地，将等摩尔的四氯四碘荧光素钠与带有胺基的卤代烷烃溶于N,N-二甲基甲酰胺中，在75℃～85℃下油浴反应5～7h。

生成的四氯四碘荧光素衍生物中带有胺基，能与聚谷氨酸中的游离羧基发生反应。

(2)对聚谷氨酸(分子量M_n＝1000～50000，优选为10000)(该分子量对应的m+n值为87)进行羧基活化处理后，加入所述四氯四碘荧光素衍生物，反应生成所述基于聚谷氨酸与四氯四碘荧光素键合物的抗肿瘤药物。

所述羧基活化处理是：先将聚谷氨酸溶于水中，调节pH至5.0～6.5(优选为调节pH至6)；然后加入两倍于聚谷氨酸羧基摩尔量的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，活化10-20min(优选为活化15min)。