[发明专利]用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制备

权利要求书

1.一种用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制备方法，其主要特征为以羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液，再与胶原蛋白溶液共混成复合溶液，经冻融固化而成，可替代传统的神经缝接方法，在周围神经损伤的治疗时用于小距离神经缺损的套接。 

a.制备酸性条件下的浓度为1.5-2.5％(w/v)的羧甲基几丁质溶液； 

b.将聚乙烯醇溶于热的注射用水中，充分搅拌，静置除去气泡，最终制备聚乙烯醇溶液浓度为10-20％(m/v)。 

c.羧甲基几丁质和聚乙烯醇，其比例为4/1-1/4(m/m)；混合溶液。 

d.制备酸性条件下的浓度为1-1.5％(w/v)的胶原蛋白溶液； 

e.制备羧甲基几丁质与聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液：将上述胶原蛋白溶液与羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液按照体积比为5∶5、6∶4、7∶3或8∶2的比例混合成复合溶液，用超声波超声使溶液混合均匀，然后用高速离心机离心30min，脱泡； 

f.制备神经导管：在无菌环境下，将上述羧甲基几丁质与聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液涂层在外径0.5-1.6mm的模具上，涂层均匀后，在0.5％的氢氧化钠溶液中固化，然后用酒精脱水，注射用水洗涤，在30～40℃下烘至半干燥状态，然后重复上述涂层、固化、脱水、洗涤和烘干过程，直至导管壁厚达到150-200μm，然后将带模具的多层导管在注射用水中浸泡5min，脱模，用注射用水洗涤，自然晾干，包装后灭菌。 

2.根据权利要求1所述的羧甲基几丁质复合神经导管制备方法，其特征在该方法包括以下步骤： 

a.制备羧甲基几丁质溶液：取新鲜蟹壳，去除头、脚和尾，用清水洗净，分别用5％HCl和10％的NaOH浸泡去除钙和蛋白，洗至中性，烘干，磨粉得到粉末几丁质，取粉末几丁质在50％的NaOH溶液中100℃以上脱乙酰反应24h以上，然后中和，用注射用水洗涤至中性，酒精脱水，最后真空干燥得脱乙酰度为85-95％的羧甲基几丁质，将该羧甲基几丁质溶解在2％(v/v)的醋酸中，使最终羧甲基几丁质溶液浓度为1.5％(w/v)； 

b.制备聚乙烯醇溶于热的注射用水中，充分搅拌，静置除去气泡，最终聚乙烯醇溶液浓度为10％(w/v)； 

c.羧甲基几丁质和聚乙烯醇，其比例为4/1-1/4(m/m)配比混合溶液； 

d.制备胶原蛋白溶液：以牛跟腱为原料，进行脱脂处理和清洗后，冷冻，切片，用高速组织捣碎机捣碎，洗提，离心；取沉淀用2％(v/v)醋酸抽提，用胃蛋白酶消化，牛跟腱与胃蛋白酶的重量比为100∶1，提取72小时，过滤，高速离心30min；取上清液加入氯化钠至最终浓度为2.5mol/L，进行盐析，去除杂蛋白，高速离心30min，取沉淀溶解在2％(v/v)醋酸，使最终胶原蛋白的浓度为1.5％(w/v)； 

d.制备羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液：将上述胶原蛋白溶液与羧甲基几丁质与聚乙烯醇混合溶液的复合溶液按照体积比为5∶5、6∶4、7∶3或8∶2的比例混合，用超声波超声使溶液混合均匀，然后用高速离心机离心30min，脱泡； 

e.制备神经导管：在无菌环境下，将上述羧甲基几丁质与聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液涂层在外径0.5-1.6mm的模具上，涂层均匀后，在0.5％的氢氧化钠溶液中固化，然后用酒精脱水，注射用水洗涤，在30-40℃下烘至半干燥状态，然后重复上述涂层、固化、脱水、洗涤和烘干过程，直至导管壁厚达到150-200μm；然后将带模具的多层导管在注射用水中浸泡5min，脱模，用注射用水洗涤，自然晾干；采用双层无菌包装后，进行⁶⁰Co辐照灭菌。 

3.根据权利要求1或2所述的一种用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制备方法，其特征在于其中e，制备羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液：将上述胶原蛋白溶液与羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液按照体积比为7∶3的比例混合。