[发明专利]用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制备

说明书

技术领域

本发明涉及医用生物材料技术领域，是一种涉及新型材料组成的神经导管制备方法，在进行周围神经缺损的治疗时可作为神经桥接管使用，并可以吸收及降解生物材料。

背景技术

周围神经缺损修复是一直困扰临床的一个难题。传统的修复方法如外膜缝合其疗效优良率仅为50％，在创伤外科领域，神经损伤修复是靠神经端端缝合，但由于周围神经是混合神经，而且目前还缺乏在手术中能够快速而准确地辨别神经断端感觉神经和运动神经纤维的科学鉴别方法，及时应用精细的显微镜下缝合，也难以避免在神经端端缝合后，因感觉、运动神经纤维的错向对接，而影响神经缝合的疗效，影响神经功能的恢复。近年来，有学者主张在神经断端间留2～3mm的间隙，由于神经的趋化作用，有利于使近端感觉神经纤维和运动神经纤维分别与远端相应神经纤维对接，从而提高神经修复效果。

羧甲基几丁质是甲壳素脱乙酰化的产物，大量的相关研究证明羧甲基几丁质是一种生物相容性好、可生物降解吸收以及无毒副作用的天然多糖，与聚乙烯醇混合溶液与胶原蛋白后形成一种新型、优良的医用生物材料，医用聚乙烯醇也是经过临床使用证明具有良好的生物相容性和良好的止血功能，它可以起到赋形剂的作用。胶原是组成胶原纤维的蛋白质，约占哺乳动物总蛋白质的1/3，其在皮肤和结缔组织中含量丰富，但一种成分的羧甲基几丁质导管弹性差，易破碎，神经断端无法在管中固定。

以羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液与胶原蛋白为基材神经导管不仅可以起到支架桥接作用，而且具有神经营养的作用，可以较好地促进神经再生。

非生物降解材料主要有硅胶管、碳纤维管、聚酯纤维管等，此类导管本身具有有一定毒性，管壁压缩神经、需二次手术取出导管等弊端。

用此制造导管生物相容性好、具有良好生物力学、可拉伸及在体内可降解吸收的导管在临床上具有很重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种拉伸程度大、在体内可维持较长时间、可降解吸收的一种用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制造方法。

本发明提供一种用于周围神经缺损的羧甲基几丁质复合神经导管的制造方法，该神经导管的主要成分羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液和胶原蛋白溶液复合溶液，通过复合溶液在模具上进行层层固化制得的，具体包括以下步骤：

a.制备酸性条件下浓度为1.5-2.5％(w/v)的羧甲基几丁质溶液；

b.制备浓度为10-20％(w/v)的聚乙烯醇溶液；

c.羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合，其比例为4/1-1/4(m/m)混合溶液；

d.制备酸性条件下的浓度为1-1.5％(w/v)的胶原蛋白溶液；

e.制备羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液：将上述胶原蛋白-羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液复合溶液按照体积比为5∶5、6∶4、7∶3或8∶2的比例混合，用超声波超声使溶液混合均匀，然后用高速离心机离心30min，脱泡；

f.制备神经导管：在无菌环境下，将上述羧甲基几丁质和聚乙烯醇混合溶液-胶原蛋白溶液复合溶液涂层在外径0.5-1.6mm的模具上，涂层均匀后，在0.5％的氢氧化钠溶液中固化，然后用酒精脱水，注射用水洗涤，在30～40℃下烘至半干燥状态，然后重复上述涂层、固化、脱水、洗涤和烘干过程，直至导管壁厚达到150-200μm，然后将带模具的多层导管在注射用水中浸泡5min，脱模，用注射用水洗涤，自然晾干，包装后灭菌。

上述神经导管的制造方法，更具体的操作步骤如下：

a.制备羧甲基几丁质溶液：取新鲜蟹壳，去除头、脚和尾，用清水洗净，分别用5％HCl和10％的NaOH浸泡去除钙和蛋白，洗至中性，烘干，磨粉得到粉末几丁质，取粉末几丁质在50％的NaOH溶液中100℃以上脱乙酰反应24h以上，然后中和，用注射用水洗涤至中性，酒精脱水，最后真空干燥得脱乙酰度为85-95％的羟甲基几丁质，将该羟甲基几丁质溶解在2％(v/v)的醋酸中，使最终羟甲基几丁质溶液浓度为1.5％(w/v)；

b.将羧甲基几丁质溶液与聚乙烯醇溶液混合2/1(m/m)，充分搅拌，静置除去气泡，制得混合溶液；