[发明专利]一种单胺氧化酶抑制剂的制备方法

说明书

本发明公开了一种单胺氧化酶抑制剂的制备方法。该制备方法包括下述步骤：(1)用乙醇沉淀乳杆菌(Lactobacillus)的发酵液，取上清液；(2)在上清液中加入水和乙酸乙酯进行萃取，将乙酸乙酯相提取液蒸发除去溶剂得到酯相提取物；(3)将步骤(2)的酯相提取物进行柱层析正相洗脱，即可。本发明的制备方法得到的单胺氧化酶抑制剂来源于天然产物，从乳杆菌发酵产物中分离纯化并制备得到，其毒性低、安全性高，有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及食品、药物和保健品领域，尤其涉及一种单胺氧化酶抑制剂的制备方法。

背景技术

人口老化是21世纪人类面临的一个主要难题。与衰老有关的疾病，比如阿尔茨海默症(老年痴呆症)、帕金森氏综合症等，已逐渐成为人类健康的大敌和社会繁荣的沉重负担，有效的药物治疗对于缓解疾病至关重要。这类疾病其根源多与人体内的单胺氧化酶活性异常升高有关，因此寻找或合成具有靶向抑制单胺氧化酶活性的物质成为研发此类疾病药物的重要方向之一。

单胺氧化酶(monoamine oxidase，MAO，EC 1.4.3.4)，全名为单胺氧化还原酶，是一种黄素蛋白酶，主要位于神经元细胞、胶质细胞的线粒体外膜上，多分布于脊椎动物的肝和脑中。它在大脑和周围神经组织中催化一些生物体产生的胺，氧化脱氨产生过氧化氢。根据底物选择性和对抑制剂的灵敏度，单胺氧化酶被分为A和B两种亚型，分别由不同的基因编码，具有70％的氨基酸序列同源性，有着不同的底物特异性和三维结构。MAO-A的底物多为极性芳香胺，如对5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine，5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine)、多巴胺(dopamine)和抑制剂氯吉兰(clorgyline)具有高亲和性；而MAO-B则对非极性芳香胺，如苯乙胺(phenethylamine，PEA)、苄胺(benzylamine)和抑制剂丙炔苯丙胺(selegiline)具有高亲和性。脑内多巴胺的分解代谢主要依靠MAO-B，而MAO-A仅占作用的20％。MAO-B可将多巴胺分解为3,4-二羟基苯乙酸和高香草酸，同时产生小分子H2O2，对神经细胞产生毒性作用；也可使刺激多巴胺分泌、抑制多巴胺再摄取的β-苯乙胺脱氨基失去活性；还能将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢嘧啶(1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine，MPTP)分解为具有神经毒性的1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion，MPP⁺)。因此，抑制MAO-B的活性可减少多巴胺的降解和再摄取，提高脑内多巴胺浓度，并通过降低H₂O₂、MPP⁺等神经毒素水平延缓黑质细胞的死亡过程。由于MAO-B抑制剂不仅能改善帕金森病症状，而且还能起神经保护作用，因此是目前抗帕金森病药物研发的热点。MAO-A主要分布在外周胃肠道、肝脏、肾脏、肺；在脑内主要分布在肾上腺素能神经元内。MAO-A的一个重要作用就是平衡大脑中5-羟色胺的分泌。MAO-A的高低直接影响个体的情绪水平，进而对其行为产生影响。目前，MAO-A基因与暴力攻击行为的关联性也是研究的一个热点。而MAO-A抑制剂可在一定程度上对个体的暴力情绪水平产生一定的影响。

临床上应用MAO抑制剂来治疗某些神经系统疾病，已报道的MAO抑制剂种类有限，如异喹啉类和四氢异喹啉、4-哌啶、恶二唑，以及来源于植物或真菌的天然化合物，如氧二苯甲酮、香豆素、二苯并呋喃、黄酮、吖啶酮。近来还有研究证明了从黄连粳稻中获得的原小檗碱类异喹啉生物碱如黄连素、巴马汀和黄连等均有MAO抑制作用。其中黄连显示出对鼠脑部的MAO活性具有强烈的抑制效果。合成的不可逆抑制剂用于临床常具有较强的副作用，如肼类[Ph-(R)-HN-NH-]可能导致肝脏毒性，苯丙胺可能会引发心血管疾病。因此，开发更多种类的安全、高效和低毒副作用的MAO抑制剂在治疗和缓解神经退行性疾病和抑郁症等疾病中具有重要的意义。