[发明专利]白血病微小残留病WT1基因快速检测方法的引物和试剂盒

权利要求书

1.一种白血病微小残留病WT1基因快速检测方法的引物，其特征在于，引物F3:其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；引物B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；引物FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，引物BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；引物LP：其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示。

2.一种白血病微小残留病WT1基因快速检测方法的试剂盒，其特征在于，内含LAMP反应液、阳性对照、阴性对照，所述LAMP反应液的成分为：0.04μmol/μL pH为8.8的Tris-HCl，0.02μmol/μL KCl，0.016μmol/μL MgSO₄，0.02μmol/μL(HN₄)₂SO₄，0.002μl/μL Tween₂₀，1.6μmol/μL甜菜碱，0.0028μmol/μL×4种dNTPs，10U/μL逆转录酶，8U/μL Bst DNA聚合酶，0.00005μmol/μL钙黄绿素，0.2pmol/μL引物F3，0.2pmol/μL引物B3，1.6pmol/μL引物FIP，1.6pmol/μL引物BIP，0.8pmol/μL引物LP；

阳性对照为：反应时在反应液中加入WT1RNA表达阳性的NB4细胞的基因组RNA；阴性对照为：反应时在反应液中加入超纯水。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，LAMP反应液为1ml、阳性对照50μL、阴性对照1ml。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，上述试剂盒还包括：反应管50个，1-10μL移液器头100个。

5.如权利要求2-4任一所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，取20μL反应液置于反应管中，将5μL待检RNA加入反应液内，用移液器吹打混匀，盖好反应管的盖子，将反应管置于水浴锅中进行扩增，扩增条件为：60-65℃水浴恒温反应25-30min。

6.如权利要求5所述的使用方法，其特征在于，初次使用本试剂盒时设置阴性对照和阳性对照。