[发明专利]一种快速检测微生物胞外呼吸活性的方法在审
| 申请号： | 201410686040.6 | 申请日： | 2014-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN104458607A | 公开（公告）日： | 2015-03-25 |
| 发明（设计）人： | 温俊林;周顺桂;陈俊华;陆琴 | 申请（专利权）人： | 广东省生态环境与土壤研究所 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 郑莹 |
| 地址： | 510650 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 微生物 呼吸 活性 方法 | ||
1.一种快速检测微生物胞外呼吸活性的方法，其特征在于：包括以下操作步骤：
1）将待测的微生物菌悬液中加入显色液进行显色反应；
所述显色液含有柠檬酸钠、磷酸氢二钠、四甲基联苯胺和过氧化氢，pH为4～5；
2）往上一步的反应液中加入终止液以终止显色反应，然后检测反应液在450nm处的OD值；
3）结果分析：OD450nm值越大说明待测微生物胞外呼吸活性越强。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的微生物菌悬液中微生物浓度不小于2×108 cfu/ml。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的微生物菌悬液中的液体为生理盐水或HEPES缓冲液。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述显色液的体积为微生物菌悬液的0.8～1.2倍。
5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述显色液含有80～120mM柠檬酸钠，180～220mM磷酸氢二钠，0.3～0.35mM四甲基联苯胺和1.8～2.2mM过氧化氢，pH为4～5。
6.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述的显色液含有100mM柠檬酸钠，200mM磷酸氢二钠，0.32mM四甲基联苯胺和2mM过氧化氢，pH为4.3。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的显色反应时间为15～25min，温度为18～27℃。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述终止液的体积为显色液体积的0.4～0.6倍。
9.根据权利要求1或8所述的方法，其特征在于：所述终止液为硫酸溶液。
10.根据权利要求1或8所述的方法，其特征在于：所述终止液为1.8～2.2M硫酸溶液。
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