[发明专利]一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于烟草质量安全领域，具体涉及一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法。

背景技术

烟草作为吸食品，其农药残留量问题已成为吸烟安全性问题中的重要组成部分，烟草及烟草制品农药残留量指标是各国在烟草制品质量控制中的重要内容，已成为国际市场烟叶评价和选购的重要因素，也是烟草国际贸易中进行商品检验的重要内容。农药马来酰肼是烟草农残检测的重要指标，国际烟草科学研究合作中心(CORESTA)农用化学品委员会(ACAC)在2008年就提出了烟草及烟草制品中马来酰肼在内的136种农药的推荐性农残限量。

马来酰肼(maleic hydrazide)又名抑芽丹，为一种植物抑芽剂。由于马来酰肼较易与烟草中的糖类等物质形成结合态马来酰肼，且烟草及烟草制品中化学物质较多，故对于马来酰肼的提取和分析往往难以实现。

目前，烟草中的马来酰肼残留量分析方法，主要以在酸性(或者碱性)条件下加热煮沸回流的方式提取，或者以酸性或碱性有机溶剂超声提取。由中国烟草总公司郑州烟草研究院牵头起草的行业标准C/T 405.5-2011《烟草及烟草制品多种农药残留量的测定第5部分：马来酰肼农药残留量的测定高效液相色谱法》使用盐酸水溶液经沸水浴加热回流，使用SPE-C18柱层析净化后由HPLC测定；由中国农科院发表的专利《一种烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法》采用震荡萃取、C18小柱净化、HPLC法测定。这些方法存在如下几个缺点：(1)回流法较难控制溶液pH值，需要高温加热，有一定安全隐患；(2)采用外标法定量，对于实验每一个步骤都需要精确控制或定容，操作复杂；(3)超声萃取的提取效率较低，不能完全萃取结合态的马来酰肼。因此，有必要做进一步的研究和探讨。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，用于解决现有技术中缺乏准确控制pH值，操作简便，效率高，定量方法准确、简便的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，采用微波辅助萃取，再采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定烟草 及烟草制品中马来酰肼的残留含量，并使用内标标准曲线法定量。

所述一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，包括以下步骤：

1)标准溶液的配制：配制内标溶液和标准溶液；

A、称取马来酰肼的标准品，加入溶剂定容，配成标准储备溶液；

较佳的，所述马来酰肼标准品的含量为250mg。

较佳的，所述标准储备溶液中马来酰肼的浓度为10μg/ml。所述标准储备溶液在4℃冰箱中避光保存，有效期6个月。

B、称取马来酰肼-d2的标准品，加入溶剂定容，配成内标溶液；

较佳的，所述马来酰肼-d2标准品的含量为50mg。

较佳的，所述内标溶液中马来酰肼-d2的浓度为1g/L。所述内标溶液在4℃冰箱中避光保存，有效期6个月。

较佳的，所述马来酰肼-d2为氘代试剂。具体的，所述马来酰肼-d2为氘代马来酰肼。所述马来酰肼-d2为商品化试剂，其化学性质稳定，适于作为内标。

C、分别移取一定体积的步骤A中标准储备溶液，再加入一定体积的步骤B中内标溶液，用溶剂定容配制为一系列不同浓度的标准溶液。

较佳的，所述标准溶液中马来酰肼的浓度为0.01-1μg/ml。

较佳的，所述内标溶液的加入量为20μl。

较佳的，步骤A、B或C中，所述溶剂为乙酸-水溶液。进一步的，所述乙酸-水溶液为体积百分比为1％的乙酸-水溶液。

2)样品前处理：称取烟草样品，加入盐酸和步骤1)所述的内标溶液，进行微波辅助萃取，冷却后过滤，待测；

较佳的，所述烟草样品的取样量为0.4-0.6g。优选的，所述烟草样品的取样量为0.5g。

较佳的，所述盐酸的浓度为1.5-2.5mol/L。进一步的，所述盐酸的浓度为2mol/L。所述盐酸可酸解烟叶纤维，将其中的结合态的马来酰肼萃取到溶液中。

较佳的，所述烟草样品、盐酸、内标溶液放置于微波消解罐中。

较佳的，所述微波辅助萃取的条件为：微波萃取仪的功率：1100-1300W；微波加热程序：初始温度20℃保持1min，在10min内以14-18℃/min的速率升至160-200℃，保持30min。