[发明专利]一种IgG1吸附剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种属于医学领域，具体涉及一种可用于血液灌流的IgG1吸附剂及其制备方法和应用。

背景技术

肾移植受者体内群体反应性抗体(PRA)的存在及该抗体的致敏程度对于移植术后发生急性排斥反应关系甚为密切，对移植器官的存活率也有显著影响。免疫高敏(PRA>80％)即PRA水平较高患者的肾移植效果较差，患者易产生超急性、加速性、急性排斥反应，直接导致移植物失功或缩短移植术后肾存活时间。有研究发现只有IgG类抗HLA抗体才是真正影响器官移植物存活的抗体。

目前，对高PRA水平患者进行预处理以使其可接受肾移植手术是全球性难题。临床常用的手段及其限制如下：(1)良好的HLA配型，可杜绝或减少急性排斥的发生率，但等待合适配型会导致手术时间延后。(2)静脉注射小剂量免疫球蛋白(1vIG)或联合血浆置换(PP)进行脱敏治疗也经常采用，但术后急性排斥反应(AHR)发生率较高。(3)血浆置换能够清除部分PRA抗体，但有益物质的丢失尤其此法本身就是一种容易引起人体致敏反应的方式，使用受到限制。(4)使用新型免疫抑制剂如Neoral、MMF、FK506等，其抗排斥反应功能得到公认，但是除了药物价格昂贵且需长期服用外，对人体的毒副性作用也不容忽视。

目前临床应用较多、效果较好的方式是免疫吸附(IA)，最具有代表性的是1986年首次应用于抗移植排斥反应蛋白A免疫吸附剂。蛋白A吸附材料对多种免疫性疾病的治疗有效性已经得到证实，并获得美国FDA批准。但是，蛋白A吸附材料也存在一些缺陷，从而限制了它的推广。首先，蛋白A价格高昂，给普通患者带来了沉重的经济负担；其次，蛋白A作为一种蛋白质配基而容易变性，吸附材料的生产、运输、保存和使用带来不便；其三，蛋白A是一种生物源性大分子，如果脱落容易给患者带来风险。

另外，蛋白A吸附柱等免疫吸附剂采用的载体活化方法一般采用环氧氯丙烷法，手臂分子只有四个原子，链节较短，对于IgG类大分子的吸附存在空间位置上的需求难以匹配。如果想延长手臂分子，最通常的方法是先将多糖类载体的羟基用环氧氯丙烷接上二胺类间隔臂，再经醛化(如戊二醛)后与配基偶联生成希夫碱，最后还原希夫碱双键得到吸附材料。该制备方法中，活化步骤繁琐，且经过多步反应后，载体上用于固载配基的活性官能团不断减少。因此，增加了免疫吸附剂的制备成本，并影响了其吸附性能。

因此，如何克服蛋白A吸附材料的这些缺陷，设计和构建既具有相当的IgG吸附能力的免疫吸附效率，又具有稳定的物理化学性质，且具有相对低廉的成本的新型免疫吸附剂，具有重要的研究价值和现实意义。

发明内容

本发明的第一目的在于克服吸附材料的缺陷，提供一种安全、有效、成本低廉，性能稳定可靠的IgG1吸附剂。本发明的第二目的是提供上述IgG1吸附剂的制备方法。本发明第三个目的在于提供上述IgG1吸附剂的应用，在血液中IgG1的吸附和临床上清除与IgG1相关的器官移植领域的群体性反应抗体(PRA)的应用。

本发明的第一个方面是提供一种IgG1吸附剂，采用酸酐交联后的琼脂糖微球或纤维素微球作为载体，所述酸酐为乙二胺四乙酸酐、1,4-二苯二胺四乙酸酐或1,4-二苄二胺四乙酸酐，所述配基为酪氨酸或色氨酸；

所述酸酐交联后的琼脂糖微球或纤维素微球的化学结构式如下所示：

所述IgG1吸附剂的化学结构式如下所示∶

其中，

W为琼脂糖微球或纤维素微球，

X为酸酐交联后的琼脂糖微球或纤维素微球，

Y为亚乙基、对亚苯基或对亚二甲苯基，

R为对羟基苯基或β-吲哚基。

优选地，活化载体的酸酐的有效量为110-180μmol/ml。

优选地，载体固载配基的量为70-130μmol/ml。

本发明的第二个方面是提供本发明第一个方面所述的IgG1吸附剂的制备方法，包括以下步骤：

(a)琼脂糖微球或纤维素微球的交联：将琼脂糖微球或纤维素微球、酸酐和液态有机碱在30-40℃下反应4-10h，过滤，产物用水洗，其中，琼脂糖微球或纤维素微球、酸酐和液态有机碱的体积比为1∶(0.01-0.2)∶(20-50)；反应式如下：

其中，W为琼脂糖微球或纤维素微球，Y为亚乙基、对亚苯基或对亚二甲苯基；