[发明专利]草木犀药材指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱在审
申请号: | 201410704954.0 | 申请日: | 2014-11-28 |
公开(公告)号: | CN105699564A | 公开(公告)日: | 2016-06-22 |
发明(设计)人: | 张丹;冯彩丽;徐江平 | 申请(专利权)人: | 舒泰神(北京)生物制药股份有限公司;北京舒泰神新药研究有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 | 代理人: | 许静;黄灿 |
地址: | 100176 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 草木 药材 指纹 图谱 构建 方法 及其 标准 | ||
1.一种草木犀药材高效液相色谱指纹图谱的构建方法,包括如下步骤:
1)称取草木犀药材粉末,加入体积百分浓度为30~70%的甲醇水溶液, 超声震荡提取,将提取液过滤得到滤液,即得到待测溶液;
2)将步骤1)获得的待测溶液进行高效液相色谱分析,用十八烷基硅烷键 合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以质量百分浓度为0.05~0.2%磷酸水溶 液为流动相B,进行线性梯度洗脱,得到草木犀药材的指纹图谱,其中,流速 为0.8~1.2ml/min;检测波长为275nm。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中梯度洗脱程 序以如下体积比浓度配置进行:
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)中梯度洗脱程 序以如下体积比浓度配置进行:
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)中十八烷基硅 烷键合硅胶为YMCJ'sphereODS-M80、YMC-PackODS-A或AgilentEclipse PlusC18;流动相B为质量百分浓度为0.1%的磷酸水溶液;流速为1.0ml/min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中,所述高效 液相色谱分析的柱温25~45℃。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法还包括配制香豆 素对照品溶液,并将其进行高效液相色谱分析,然后以香豆素对照品溶液的指 纹图谱为参照,根据相对保留时间标定供试品溶液的指纹特征的步骤。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中,所述超声 振荡的时间为30~40min。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中,还包括将 滤渣重复添加体积百分浓度为30~70%的甲醇水溶液,超声震荡提取,过滤, 将滤液合并,并定容至250ml,作为待测溶液;其中,所述草木樨药材粉末或 者滤渣与体积百分浓度为30~70%的甲醇水溶液的添加比例为2g:80~100ml。
9.根据权利要求1或8所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中,所述 甲醇水溶液的体积百分浓度为50%,所述草木樨药材粉末或者滤渣与甲醇水溶 液的添加比例为2g:90ml。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中,所述过 滤为用孔径为0.45um的滤膜过滤。
11.一种草木樨药材的高效液相色谱指纹图谱,由权利要求1-10中任意一 项所述的方法获得。
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