[发明专利]一种3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及化合物生产领域，尤其是一种3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法。

背景技术

千金子系大戟科植物续随子Euphorbia lathyris的干燥成熟种子,是我国传统中药材之一。千金子性温,味辛,有小毒,主要功效为逐水消肿、破血消癥,用于治疗水肿、痰饮、积滞胀满、二便不通、血瘀经闭,外治顽癣、疣赘。在国外,该植物种子早有用于癌症治疗的记载,并且其甲醇提取物对于抗恶性肿瘤相关活性的初步筛选测定中已显示具有抗癌的效果。3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇就是这样的一类化合物，是广泛存在于大戟科植物的一种重要的天然活性成分，其结构如下：

越来越多的研究表明，多环二萜在大戟属植物中是广泛存在的。该属植物不失为一潜在的、蕴含丰富二萜化合物的次生代谢产物库。无论是在发现活性先导化合物方面，还是在进一步探讨植物生源合成机制、阐明大戟属植物的化学分类等方面，大戟属多环二萜的研究都将体现出重要的意义。

但到目前为止，在天然产物提取物中用液相色谱法提取3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的方法还未见报道，提取到高纯度或者单体3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇更是难以实现，这在一定程度上也阻碍了3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇在作为中药开发方面的进展。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，具体步骤如下：

(1)取千金子(市购)为原料，进行粉碎得到千金子粉末；

(2)取千金子粉进行有机试剂提取，有机试剂为乙酸乙酯，收集提取后的上清，过滤，浓缩、干燥；

(3)将步骤(2)得到的沉淀重复1～5次提取，收集提取后的上清，进行过滤，浓缩、干燥，得到QJZ初提物；

(4)取步骤(3)得到QJZ初提物用流动相进行全部溶解，所述流动相为流动相A或流动相B或两者的组合，经制备液相DAC正相色谱柱进行分离，采用二元流动相体系进行洗脱分离，所述流动相A和流动相B采用正己烷、乙醇中的一种或几种的组合，洗脱方式梯度洗，检测波长为210nm，收集目的峰，干燥后得到组分化合物QJZ-8，60℃鼓风干燥箱吹干，进行下一步分离纯化；

(5)取步骤(4)得到QJZ-8组分用流动相进行全部溶解，所述流动相为流动相A或流动相B或两者的组合，经制备液相色谱柱进行分离，采用二元流动相体系进行洗脱分离，所述流动相A和流动相B采用正己烷、乙酸乙酯、乙醇、二氯甲烷、甲醇中的一种或几种的组合，洗脱方式梯度洗，检测波长为210nm，收集目的峰，干燥后得到组分化合物QJZ-8-5，60℃鼓风干燥箱吹干，QJZ-8-5为最终活性目标单体3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇。

优选的，上述3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，所述步骤(2)中有机溶剂提取的温度为40～60℃，提取时间为4～6h，静置一夜。

优选的，上述3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，所述步骤(3)中所述千金子粉或沉淀与有机试剂的重量体积比按Kg：L计为1:(3～8)，将千金子粉或沉淀与有机试剂进行混合浸提。

优选的，上述3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，所述步骤(4)的分离过程中一维液相色谱采用的色谱柱类型为正相硅胶轴向加压色谱柱，流速：600ml/min，检测波长:210nm，使用时柱温为室温或25-40℃。

优选的，上述3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，所述步骤(4)的分离过程中取QJZ初提物用60-80％正己烷-乙醇溶解至浓度为1ml/ml，混合均匀后，用0.45μm有机膜抽滤后经制备液相DAC正相色谱柱进行分离。

优选的，上述3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，所述步骤(4)的分离过程中洗脱方式具体为100％正己烷等度洗脱5min，100％正己烷—70％乙醇梯度洗脱35-50min，100％乙醇10min。

优选的，上述3-O-烟酰基-5,15-O-二乙酰基续随子醇的制备方法，所述步骤(5)的分离过程中二维液相色谱采用的色谱柱类型为ACCOH Diol色谱柱，流速：2-4ml/min，检测波长:210nm，使用时柱温为室温或25-40℃。