[发明专利]黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法及其应用在审
| 申请号： | 201410707944.2 | 申请日： | 2014-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN105687253A | 公开（公告）日： | 2016-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张耀洲;马琳 | 申请（专利权）人： | 天津耀宇生物技术有限公司 |
| 主分类号： | A61K36/06 | 分类号： | A61K36/06;A61P35/00 |
| 代理公司： | 宁波市鄞州甬致专利代理事务所(普通合伙) 33228 | 代理人： | 李迎春 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区天津开发*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黄绿 蜜环菌抗 肝癌 活性 组分 提取 方法 及其 应用 | ||
1.一种黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)以黄绿蜜环菌子实体为原料，室温阴干处理后，在40～60℃温度下烘干脱水，然后进行超微粉碎处理，获得超微粉；
(2)将步骤(1)所得的超微粉按1g︰(5～15)mL的料液比加入乙醇，在30～70℃温度下提取1～6h，每0.5h～1h搅拌一次，室温静止1～5h后离心，取沉淀重复1～3次，合并所得上清液减压浓缩至膏状，获得黄绿蜜环菌小分子乙醇提取物；
(3)按质量体积比加入5～10倍的正己烷-乙醇二元混合溶剂，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到黄绿蜜环菌小分子乙醇提取物的样品溶液；
(4)将步骤(3)获得的小分子乙醇提取物的样品溶液在以填料为正相分离材料Silica的制备色谱上进行分离纯化，采用A为正己烷、B为乙醇的二元流动相体系，分离纯化的条件为：0～18min93％A-7％B等度洗脱、18～28min60％A-40％B等度洗脱、28～45min5％A-95％B等度洗脱，根据紫外吸收光谱收集20-26min洗脱液、27.25-28.5min洗脱液、38.5-41min洗脱液，减压浓缩并烘干，得到本发明抗肝癌活性组分。
2.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(1)中超微粉碎在-20～4℃温度下进行，时间为5～20min。
3.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(2)中乙醇的提取温度为30～70℃。
4.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(3)中正己烷-乙醇二元混合溶剂的正己烷与乙醇的体积比为2︰1。
5.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(3)中有机滤膜的孔径为0.22～0.45μm。
6.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(4)中制备色谱采用的分离色谱柱的直径为50mm、柱长为250mm，正相分离材料Silica的粒径为8～10μm。
7.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(4)中制备色谱的检测波长为260nm，进样量为1.4g，流速为50mL/min。
8.根据权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分的提取方法，其特征在于：所述步骤(2)、(4)中减压浓缩采用旋转蒸发仪进行，工艺条件为温度70℃、真空度0.08Mpa。
9.权利要求1所述的黄绿蜜环菌抗肝癌活性组分在制备抗肝癌药物或抗肝癌保健食品中的应用。
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