[发明专利]从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法及其应用

权利要求书

1.一种从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)以黄绿蜜环菌子实体为原料，室温阴干处理后，在40～60℃温度下烘干脱水，然后进行超微粉碎处理，获得超微粉；

(2)将超微粉按1g︰(6～15)mL的料液比加入分析纯水，混合均匀后在60～90℃温度下提取1～2h，提取结束后在4000～8000rpm转速下离心，取沉淀重复1～3次，最后得到沉淀放入烘箱50～80℃干燥处理；

(3)在步骤(2)所得的干燥沉淀中按质量体积比加入1～5倍的丙酮冷浸提取3～8h，提取结束后在4000～8000rpm转速下离心，取沉淀重复1～3次，收集所有上清液减压浓缩至膏状，获得小分子提取物；

(4)在小分子提取物中按质量体积百分比加入5～10倍的正己烷-乙酸乙酯二元混合溶剂，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到含有小分子提取物的一维上样溶液；

(5)对一维上样溶液进行高效液相色谱分离：采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用的流动相为二元混合有机相，其中A相为正己烷，B相为乙酸乙酯，进样量为800-1200mL/针，流动相流速为600-750mL/min，检测器为紫外检测器，检测波长260nm，采用的洗脱方式为A相浓度100％等度洗脱0～15min、A相浓度60％等度洗脱15～35min、B相浓度100％等度洗脱35～60min，根据紫外吸收光谱收集25-29min洗脱液作为目的组分，减压浓缩至膏状，得到一维液相组分；

(6)在得到的一维液相组分中按质量体积百分比加入5～10倍的正己烷-乙酸乙酯二元混合溶剂，进行超声溶解，溶解后过有机滤膜，得到二维上样溶液；

(7)进行二维高效液相色谱分离：采用的色谱柱为Silica正相硅胶色谱柱，采用的流动相为二元混合有机相，其中A相为正己烷，B相为乙酸乙酯，进样量为20-80mL/针，流动相流速为40-80mL/min，检测器为紫外检测器，检测波长260nm；采用的洗脱方式为A相浓度88％等度洗脱0-45min，根据紫外吸收光谱收集27.5-36min洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，即为本发明目的化合物麦角甾醇。

2.根据权利要求1所述的从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法，其特征在于：所述步骤(4)、(6)中正己烷-乙酸乙酯二元混合溶剂中正己烷的体积分数为50～90％。

3.根据权利要求1所述的从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法，其特征在于：所述步骤(5)中的Silica正相硅胶色谱柱的尺寸为直径50-150mm、柱长250mm，其中硅球粒径为8μm，使用时柱温为室温或25-40℃。

4.根据权利要求1所述的从黄绿蜜环菌中提取麦角甾醇的方法，其特征在于：所述步骤(7)中的Silica正相硅胶色谱柱的尺寸为直径50mm、柱长250mm，其中硅球粒径为10μm，使用时柱温为室温或25-40℃。