[发明专利]从万寿菊中分离纯化槲皮万寿菊素的方法

权利要求书

1.一种从万寿菊中分离纯化槲皮万寿菊素的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）以万寿菊干花为原料，干燥后磨成粉末状得到万寿菊粗粉，用乙醇浸泡或者回流提取，然后过滤，取滤液重复1-3次，最终所得滤液进行旋转蒸发至干得粗提物，粗提物再溶于甲醇-水二元混合溶剂中，进行减压抽滤，得到粗提物浓度为50-500mg/mL的提取液；所述甲醇-水二元混合溶剂中甲醇体积分数为90-99%；

（2）对提取液进行一维液相色谱分离：采用的色谱柱为反相色谱柱DAISO C₁₈，色谱柱的尺寸为直径20mm、长度250mm，其中填料粒径为8μm，使用时柱温为室温或25-40℃；采用的流动相为A相水、B相甲醇的二元流动相，进样量为100-1000μL /针，连续进样，流动相流速为6-16mL/min，洗脱方式为B相浓度53%等度洗脱20min，检测器为紫外检测器、检测波长200-260nm，根据紫外吸收光谱收集6-12分钟洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到一维液相组分；

（3）使用甲醇-水二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解至浓度为50-100mg/mL；所述甲醇-水二元混合溶剂中甲醇体积分数为90-99%；

（4）进行二维液相色谱分离：采用的色谱柱为Acchrom X-Amide色谱柱，色谱柱的尺寸为直径10mm、长度250mm，其中填料粒径为8μm，使用时柱温为室温或25-40℃；采用的流动相为A相水、B相乙腈的二元流动相，进样量为10-500μL/针，连续进样，流动相流速为2-4mL/min，洗脱方式为B相浓度95%等度洗脱40min，检测器为紫外检测器、检测波长200-260nm，根据紫外吸收光谱收集27-33分钟洗脱液作为目的组分，旋转蒸发浓缩至干，得到目的产物槲皮万寿菊素。