[发明专利]一种蝇防御素突变体及其制备方法和用途有效
| 申请号： | 201410712363.8 | 申请日： | 2014-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN104404049A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 李钢;邹辉琴;高静雷;温静 | 申请（专利权）人： | 四川华德生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/435;C12P21/02;A23K1/17;A61K38/17;A61P31/00 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 防御 突变体 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。
2.一种重组载体，其特征在于：包含SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述的重组载体是重组pGEX-4-1质粒。
4.一种重组菌，其特征在于：它包含权利要求2或者3所述的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述的重组菌为重组大肠杆菌。
6.一种蝇防御素突变体，其特征在于：它由SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列编码。
7.根据权利要求6所述的蝇防御素突变体，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。
8.一种制备权利要求6或7所述蝇防御素突变体的方法，其特征在于：包含如下步骤：
(1)取权利要求4或5所述的重组菌，接种于含有50ug/mL氨苄青霉素的液体肉汤培养基中，37℃、220rpm震荡培养12h，用含有50ug/mL的氨苄青霉素的液体肉汤培养基重悬至OD600为0.1，于37℃培养至OD600为0.8，然后加入IPTG至终浓度为1mM，诱导表达3小时，离心，得菌体；
(2)取菌体，用GST融合蛋白纯化试剂盒分离纯化，得到结合了GST融合蛋白的树脂后，加入等体积的浓度为50U/ml的凝血酶溶液，混匀，室温震荡10小时，离心，得上清，去除凝血酶，即得。
9.权利要求6或7所述蝇防御素突变体在制备饲料添加剂或抗菌药物中的用途。
10.一种抗菌药物，其特征在于：它是以权利要求6或7所述蝇防御素突变体为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
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