[发明专利]一种快速检测Ebola病毒的试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种快速检测Ebola病毒的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒由下述步骤依次制备：

1)在Nucleoprotein基因的保守区域设计逆转录引物、扩增引物和探针：

NP_F:AGAGGAGACAACTGAAGCTAATGC；

NP_R:CTGATTGCCAAGCTGTTGGA；

NP-Probe：FAM-CAAGTCTATTCCTTCCGAAATTGGTAGTAG。

2)在GAPDH基因的保守区域设计逆转录引物和探针：

GAPDH_F：AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC；

用于逆转录引物为GAPDH_R_R:CAAGGGGTCTACATGGCAACT；

用于扩增GAPDH_ARMS_R的引物为：GGTGGAATCATATTGGAACATGT；

GAPDH_Prob_HEX：HEX-CTTTTAACTCTGGTAAAGTGGATATTGTTGCC；

3)制备RT-TaqMan试剂盒

用逆转录酶加上罗氏的热启动酶，其反应条件如下：50℃20分钟；40个循环：95℃5秒，56℃10秒，72℃30秒。

2.根据权利要求1所述的快速检测Ebola病毒的试剂盒，其特征在于，所述的逆转录酶与罗氏的金牌酶的用量比为1:1。

3.使用权利要求1所述的快速检测Ebola病毒试剂盒的方法，其特征在于，该方法为取Ebola virus病毒感染的细胞，提取RNA，用权利要求1制备的试剂盒检测Ebola virus病毒RNA。