[发明专利]一种用于脐带血造血干细胞扩增的培养体系及其应用有效
申请号: | 201410719683.6 | 申请日: | 2014-12-01 |
公开(公告)号: | CN105713879B | 公开(公告)日: | 2020-05-08 |
发明(设计)人: | 张云;李相国;高畅;孙丽娟;王冠华 | 申请(专利权)人: | 顺昊细胞生物技术(天津)股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/0789 | 分类号: | C12N5/0789 |
代理公司: | 天津协众信创知识产权代理事务所(普通合伙) 12230 | 代理人: | 刘斌 |
地址: | 300300 天津市滨海新区保*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 脐带血 造血 干细胞 扩增 培养 体系 及其 应用 | ||
1.一种用于脐带血造血干细胞扩增的培养体系,其特征在于该培养体系包括AIM-V培养基、SCF、Flt-3L,G-CSF,IL-3,StemRegenin(SR1),UM171,血小板裂解液和血管生成素样蛋白3;
各组分的含量如下:血小板裂解液 0.2-0.5%,SCF 30ng/mL,Flt-3L 10ng/mL,G-CSF30ng/mL, IL-3 10ng/mL,血管生成素样蛋白3 50-80ng/mL, SR1 400-800nM,UM171 40-80nM;
血小板裂解液的制备过程:采集的脐带血40~150ml以2:1比例缓慢加入盛有淋巴分离液的50ml离心管中,在4~25度温度下,1500-3000rpm,离心10-20min,上层为富含血小板血浆,采血袋或采血管中采用肝素作抗凝剂,上层的血清占总体积的45~50%,富含血小板的血浆放置于-80度超低温冰箱冻存,12-24h后迅速取出放置25-37度水浴中复苏,如此反复2-5次,于4-25度以2000~5000rpm离心10-30min,取上清液,0.22μm过滤,以0.2-0.5%的浓度添加到脐带血造血干细胞扩增体系中。
2.根据权利要求1所述的用于脐带血造血干细胞扩增的培养体系,其特征在于各种细胞因子的组合和小分子化合物的联合应用。
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