[发明专利]源于大鼠及其它动物的多潜能细胞

权利要求书

1.一种大鼠多潜能细胞，特征在于其表达Nanog、Oct4、FGF4和Sox-2中两个或多个基因。

2.根据权利要求1所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其表达Nanog、Oct4和Sox-2。

3.根据权利要求1或2所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其还表达碱性磷酸酶。

4.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其表达Rex 1、Stella、FGF4和Sox-2。

5.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其不表达FGF5。

6.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其在培养基中形态学上未分化。

7.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其可在培养基中被维持约两星期或更长。

8.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其可在培养基中被维持约6个月或更长。

9.根据权利要求7或8所述的大鼠多潜能细胞，特征在于在其被培养后，其后代细胞保留原始大鼠多潜能细胞的特性。

10.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其可形成嵌合体。

11.根据权利要求10所述的大鼠多潜能细胞，特征在于所述嵌合体中的所有细胞均是大鼠细胞。

12.根据权利要求10或11所述大鼠多潜能细胞，特征在于其可形成嵌合体种系。

13.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其可形成畸胎瘤或畸胎癌，且形成的畸胎瘤或畸胎癌中含有源于所有三个胚层的分化细胞。

14.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其在培养基中可作为单个细胞生长和/或增殖。

15.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于在激活素和/或FGF存在时，其被诱导分化或停止生长。

16.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于其分化不是由激活素受体被封闭所诱导的。

17.根据上述任一权利要求所述的大鼠多潜能细胞，特征在于特征在于其生长和/或分化由一种MEK抑制剂和一种GSK3抑制剂支持，该抑制剂中可选择还含有FGF受体拮抗剂。

18.一种大鼠多潜能细胞培养物，包含大鼠多潜能细胞和一种含有MEK抑制剂的培养基。

19.根据权利要求18所述的培养物，特征在于培养基还含有一种GSK3抑制剂和/或一种FGF受体拮抗剂。

20.从胚泡中获得大鼠多潜能细胞的方法，包括以下步骤：

(1)取胚泡；

(2)在含有一种MEK抑制剂和一种GSK3抑制剂的培养基中培养胚泡，以得到内细胞团；

(3)分离并解离内细胞团中的原代扩展物；

(4)从内细胞团的原代扩展物的解离物中分选单个或许多细胞；和

(5)在含有一种MEK抑制剂、一种GSK3抑制剂和一种FGF受体拮抗剂的培养基中培养分选的单个或许多细胞。

21.根据权利要求20所述的方法，特征在于所述多潜能细胞表达Nanog、Oct4、FGF4、Sox-2和碱性磷酸酶中的一个或多个。

22.根据权利要求20-21中任一项所述的方法，特征在于所述多潜能细胞表达Nanog、Oct4、FGF4、Sox-2和碱性磷酸酶中的任意两个或多个。

23.根据权利要求20-22中任一项所述的方法，特征在于所述多潜能细胞表达Nanog、Oct4和Sox-2。

24.根据权利要求23所述的方法，特征在于其多潜能细胞还表达碱性磷酸酶。

25.根据权利要求20-24中任一项所述的方法，特征在于所述多潜能细胞表达Rex 1、Stella、FGF4和Sox-2。

26.根据权利要求20-25中任一项所述的方法，特征在于所述多潜能细胞不表达FGF5。