[发明专利]一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法

权利要求书

1.一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法，其特征在于包括如下步骤：

A. 洗涤去杂：将新鲜大蒜去皮，洗去杂质；

B. 破碎浸提浓缩：将洗净的大蒜破碎，用75%的乙醇水溶液超声循环提取2次，两次提取液合并浓缩；

C. 大蒜多糖粗提液经大孔树脂处理：将浓缩液复溶上DA201极性大孔树脂柱，上样量为柱体积的10%，用水作淋洗液，浓缩流出液；

D. 经逆流色谱一步纯化大蒜多糖：逆流色谱溶剂系统为MgSO₄:PEG:H₂O，硫酸镁的百分含量为14～18%，PEG（聚乙二醇）分子量为1000～1500，含量为12%～15%；配置好的溶剂放入分液漏斗中，静止过夜，取上相作为固定相，下相作为流动相；逆流色谱仪柱温为25℃，转速为800～1000r/min，转向为正向；用上下相1：1的溶液对浓缩液进行稀释，使多糖含量为1～2mg/mL；上样体积为柱体积的1/10～1/20；定时或定量进行收集，对收集到的各管采用硫酸—苯酚法进行多糖测定；

E. 透析及干燥：将适量体积的上述收集液装入截留分子量为3000的透析袋中，对水透析过夜，将透析过的溶液进行冷冻干燥，得大蒜多糖精品。

2. 根据权利要求1所述的一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法，其特征在于：纯化大蒜多糖采用的是逆流色谱法。

3. 根据权利要求1所述的一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法，其特征在于：逆流色谱法所用的溶剂系统为MgSO₄:PEG:H₂O，其中，硫酸镁的百分含量为14～18%，PEG（聚乙二醇）分子量为1000～1500，含量为12%～15%。 

4.根据权利要求1所述的一种采用逆流色谱技术一步纯化大蒜多糖的方法，其特征在于：经逆流色谱仪纯化过的大蒜多糖溶液是装入截留分子量为3000的透析袋中，对水透析过夜后，冷冻干燥，得大蒜多糖精品。