[发明专利]一种从墨旱莲中提取分离蟛蜞菊内酯的方法

说明书

技术领域

本发明属于香豆素类化合物提取分离领域，涉及一种提取分离蟛蜞菊内酯的方法，具体涉及一种从墨旱莲中提取分离蟛蜞菊内酯的方法。

背景技术

墨旱莲(Her ba Eclipta e)为菊科鳢肠属植物鳢肠的干燥地上部分，俗称旱莲草，为常用中药之一，具有滋肝补肾、凉血止血之功能。近年来国内外研究发现墨旱莲具有较强的肝保护作用,如Wagner等通过对墨旱莲化学成分的研究发现其香豆草醚类成分对四氯化碳和氨基乳糖的大鼠肝细胞毒性具有明显的肝保护和促进再生作用。目前国内外对墨旱莲的化学成分和药理方面的研究较多，但对蟛蜞菊内酯研究的比较少。

蟛蜞菊内酯的结构式如下：

申请号为200610201098.2，墨旱莲提取物及其制备方法和用途，该发明以新鲜墨旱莲全草去除杂质，洗净，捣碎，20-30℃微波干燥，粉碎，即得。

申请号为200810031092.4，一种墨旱莲皂甙类化合物的提取方法，该发明采用乙醇微波提取，泡沫逆流色谱制备总皂甙，大孔树脂分离，反渗透膜对得到的总皂甙进行过滤，进一步除杂，得到高纯的的总皂甙类化合物。

申请号为201010603861.0，一种从墨旱莲中提取分离蟛蜞菊内酯的方法，该方法采用超临界流体萃取，正丁醇萃取，浓缩至原体积的1/15-1/8，聚酰胺树脂分离，氯仿-无水乙醇混合溶剂洗脱洗脱，收集洗脱液蒸干即得产品。

申请号为201110184589.1，一种墨旱莲提取物的制备方法及用途，该发明采用乙醇提取，大孔树脂分离，分段收集，得到产品。该发明中所得产品为皂甙和黄酮类成分及其蟛蜞菊内酯，总三萜类化合物。

申请号为201110187513.4，一种墨旱莲单体成分的分离制备方法，该发明利用墨旱莲醇提，硅胶柱层析，氯仿-甲醇洗脱，高速逆流色谱分离得到eclalbasaponins I、eclalbasaponins II、eclalbasaponins III三种有效成分的单体。

申请号为201310002410.5墨旱莲药材中总三萜皂苷的动态连续循环提取方法及装置，该方法包括原料超微粉碎，醇提，连续循环提取。

外文中有人利用乙醇室温或加热提取，提取液减压浓缩成浸膏，以不同极性有机溶剂萃取出各部位，在中极性部位(乙酸乙酯、乙醚、乙醚-甲醇4:1，正丁醇部位等)色谱法分离、提纯得到蟛蜞菊内酯单体。

Wagner等从Ealba L中提取，该技术为甲醇浸泡提取，浓缩得浸膏，乙酸乙酯萃取，经C18柱分离，梯度洗脱得到蟛蜞菊内酯。

日本技术中采用水回流提取，丁醇-水(1:1)逆流-逆流分布，SephadexLH-20柱分离。

现有技术中从墨旱莲原料中提取蟛蜞菊内酯的方法，提取步骤复杂，产率低，不适合工业化生产。

发明内容

为了解决背景技术所存在的技术问题，本发明提出了一种从墨旱莲原料中提取蟛蜞菊内酯的方法，该方法操作简单，产品含量高，回收率高，适合于工业化生产。

本发明的具体技术方案如下：

一种从墨旱莲中提取分离蟛蜞菊内酯的方法，包括以下步骤：

1]一次提取

将墨旱莲粉碎，在25-60℃条件下，采用水或浓度为1％-50％的乙醇水溶液提取1-2h，提取2-3次，然后将提取渣滤干；

2]二次提取

将滤干后的提取渣投入到密闭容器中，在20-60℃条件下，用有机溶剂提取，在提取过程中加入抗氧化剂，提取2-4h，然后浓缩处理；

上述有机溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正丁烷、丙酮中的一种或多种混合；上述抗氧化剂为BHT、TBHQ、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、VC中的一种或多种混合；上述抗氧化剂的投量为原料墨旱莲质量的0.01％-1％；

3]串联柱分离

对步骤2所得浓缩液进行两个柱分离，然后用洗脱溶剂进行处理，根据薄层斑点收集含有有效成分的洗脱液，浓缩至洗脱液体积的1/100-1/10，放置结晶；

上述两个柱包括预处理柱和常规柱；上述的预处理柱直径为10cm-50cm，高为50cm；所述的常规柱为40cm×400cm；上述的预处理柱和常规柱的填料为氧化铝、硅胶、MM500、Sephadex LH-200、C18、001×7、201×7、D204、Lx-8、LSA-10中的一种或两种；上述的洗脱溶剂为石油醚、乙酸乙酯、正丁烷、正己烷、甲醇、乙醇中的一种或多种混合；

4]结晶