[发明专利]一种将消旋体芳基邻二醇转化为手性芳基邻二醇的方法有效

专利信息
申请号: 201410735876.0 申请日: 2014-12-08
公开(公告)号: CN104561136B 公开(公告)日: 2018-07-06
发明(设计)人: 徐毅;陈颖;陈建波;许林菊;陈晨;邱静雯;何丽;杨靖文;刘文旖;叶恩侃;方达通;韩微 申请(专利权)人: 上海应用技术学院
主分类号: C12P7/22 分类号: C12P7/22;C12R1/84
代理公司: 上海申汇专利代理有限公司 31001 代理人: 吴宝根;马文峰
地址: 200235 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 邻二醇 芳基 毕赤酵母菌 消旋体 手性 乙酸乙酯萃取 氧化剂 不对称还原 产物手性 光学纯度 碱性物质 控制转速 水相体系 旋转蒸发 氧化反应 保藏 环糊精 上清液 产率 转化 细胞
【权利要求书】:

1.一种将消旋体芳基邻二醇转化为手性芳基邻二醇的方法,其特征在于具体包括下列步骤:

(1)、利用氧化剂N-溴代丁二酰亚胺在添加β-环糊精的水相体系中将消旋体芳基邻二醇氧化为对应的2-羟基芳基酮,氧化反应过程中控制温度为60℃,时间为4-12h,氧化反应结束后将所得反应液加入碱性物质调pH为7.0;

上述氧化剂N-溴代丁二酰亚胺、β-环糊精和消旋体芳基邻二醇的用量,按摩尔比计算,N-溴代丁二酰亚胺:β-环糊精:芳基邻二醇为1~2.5:1:1;

所述消旋体芳基邻二醇为消旋体苯乙二醇、消旋体间氯苯乙二醇、消旋体邻氯苯乙二醇、消旋体对溴苯乙二醇或消旋体对氯苯乙二醇;

(2)、毕赤酵母菌Pichia sp. SIT2014的培养,将收获的毕赤酵母菌Pichia sp.SIT2014细胞置于步骤(1)中pH为中性的反应液中,控制温度为30℃,180rpm的恒温摇床下进行不对称还原反应6-48h,所得的反应液控制转速为12000r/min进行离心分离5min,得到的上清液用等体积的乙酸乙酯萃取三次后,萃取液用无水硫酸钠干燥,然后用旋转蒸发仪蒸干,即得手性芳基邻二醇;

所述的毕赤酵母菌Pichiasp.SIT2014,其保藏编号为CGMCC NO.9300;

上述进行不对称还原反应所用的毕赤酵母菌Pichiasp.SIT2014和pH为中性的反应液的量,按毕赤酵母菌Pichiasp.SIT2014细胞的干重:pH为中性的反应液的量为1g:100ml的比例计算。

2.如权利要求1所述的一种将消旋体芳基邻二醇转化为手性芳基邻二醇的方法,其特征在于步骤(1)中碱性物质为磷酸氢二钾或氢氧化钾。

3.如权利要求1所述的一种将消旋体芳基邻二醇转化为手性芳基邻二醇的方法,其特征在于步骤(2)中所述的毕赤酵母菌Pichia sp. SIT2014的培养:

即首先取4℃冰箱保存的毕赤酵母Pichiasp.SIT2014 斜面菌种,挑取一环菌种接入到装有15ml种子培养基的100ml摇瓶中,在摇床上控制温度为30℃、转速为180rpm进行种子培养18h,得到种子液;

然后按种子液:发酵培养基的体积比为5:100的比例,将上述所得的种子液接种到发酵培养基中,然后在摇床上控制温度为30℃、转速为180rpm进行发酵培养24h,得到的发酵液控制转速为10000r/min进行离心10min,收获的细胞即为毕赤酵母Pichia sp.SIT2014细胞;

所述的毕赤酵母菌Pichiasp.SIT2014,其保藏编号为CGMCC NO.9300;

所述的种子培养基和发酵培养基组分相同,按每升计算,含葡萄糖15.0g,胰蛋白胨5.0g,酵母粉5.0g,KH2PO4 0.5g,K2HPO4 0.5g,MgSO4·7H2O 0.5g,余量为水。

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