[发明专利]一种油田化学剂的生物毒性评价方法

权利要求书

1.一种油田化学剂的生物毒性评价方法，其特征在于包括如下内容：

（1）发光菌复苏：将发光菌用氯化钠溶液配制成菌悬液，于冰水浴中复苏；所述的发光菌为弧菌属、发光杆菌属或异短杆菌属；

（2）同步化培养：将复苏菌悬液接种于活化培养基中，进行活化培养；活化培养后期，在菌体培养液中加入生长抑制剂，进行同步培养；经同步培养后，收集菌体细胞；所述的生长抑制剂为核酸合成抑制剂或者细胞分裂抑制剂；

（3）毒性评价：用氯化钠溶液将菌体细胞配制成具有一定发光量的菌悬液，并添加发光促进剂，用于毒性评价分析；所述的发光促进剂为六碳糖或八碳以上的醛类。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所采用的发光菌为明亮发光杆菌。

3.按照权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所采用的发光菌来自于市售的发光菌冻干粉或者是斜面或液体保藏的菌种。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中菌体复苏过程使用质量浓度为1.5%～3.0%氯化钠溶液，复苏时间2min～10min。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述的活化培养基配方为胰蛋白胨0.1wt%～0.5wt%，酵母膏0.2wt%～0.5wt%，甘油0.1wt%～0.3wt%，磷酸二氢钾0.05wt%～0.2wt%，磷酸氢二钠0.05wt%～0.2wt%，氯化钠0.2wt%～0.5wt%，pH6.5；活化培养时间为12h～18h。

6.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述的生长抑制剂为5-氟脱氧尿嘧啶、羟基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、秋水仙素、秋水仙胺中的一种或几种。

7.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中发光菌在加入生长抑制剂菌体培养液中培养5h～16h后，进行离心处理，离心转速为500rpm～1500rpm，离心时间10min～20min。

8.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中以质量浓度为2%～3%的氯化钠溶液将收集的菌体细胞进行2～4次清洗。

9.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）菌悬液中加入质量浓度为0.1%～0.3%发光促进剂。

10.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的发光促进剂为葡萄糖或辛醛。